小分子化合物抗肺癌作用以及肺癌全基因組測(cè)序研究.pdf

1、肺癌是最常見(jiàn)惡性腫瘤，并逐漸成為包括中國(guó)、美國(guó)等世界其他國(guó)家死亡率最高的癌癥。目前對(duì)早期肺癌的預(yù)防和治療雖然已經(jīng)取得很大進(jìn)展，但治療效果與預(yù)后仍欠佳，為預(yù)防和攻克肺癌，需要進(jìn)一步探索腫瘤發(fā)病機(jī)理和找尋更多新藥物進(jìn)行靶向治療。
　　正常的肺上皮細(xì)胞通過(guò)有序的細(xì)胞周期來(lái)調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)、分裂和DNA合成，一旦這種正常調(diào)控紊亂，細(xì)胞將向惡性程度演化，最終誘發(fā)腫瘤產(chǎn)生。Cyclin D1（CCND1編碼）為細(xì)胞周期G1期的關(guān)鍵調(diào)控蛋白，通過(guò)與

2、CDK4/6激酶形成復(fù)合物使Rb的Ser/Thr殘基磷酸化，使細(xì)胞周期從G1期向S期轉(zhuǎn)換。Cyclin D1在肺癌樣本中表達(dá)異常且其過(guò)表達(dá)與預(yù)后差相關(guān)聯(lián)，因此Cyclin D1可以作為肺癌靶向治療的一個(gè)靶點(diǎn)。在此基礎(chǔ)上，我們尋找并發(fā)現(xiàn)中藥來(lái)源的小分子化合物GEA能夠抑制多種肺癌細(xì)胞系增殖而對(duì)正常肺成纖維細(xì)胞和上皮細(xì)胞敏感性較差，且GEA可以促進(jìn)Cyclin D1降解，抑制CDK2激酶活性，最終導(dǎo)致周期阻滯于G1期。通過(guò)GSK3β抑制劑或

3、者siRNA可以抑制GEA引起的Cyclin D1降解，運(yùn)用蛋白酶體抑制劑進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)GEA是通過(guò)泛素-蛋白酶體途徑降解CyclinD1。有趣的是，我們還發(fā)現(xiàn)GEA可以促進(jìn)肺癌細(xì)胞自噬，并抑制PTEN/AKT/mTOR信號(hào)通路。這些都說(shuō)明GEA能夠下調(diào)Cyclin D1和誘導(dǎo)自噬，具有潛在的肺癌治療應(yīng)用前景。
　　除小分子化合物的肺癌靶向治療外，我們還進(jìn)一步研究了環(huán)境因素相關(guān)肺癌的發(fā)病機(jī)制。位于我國(guó)云南省東北部的宣威地區(qū)是當(dāng)?shù)刂饕a(chǎn)

4、煤區(qū)（特別是煙煤），其肺癌發(fā)病率居全國(guó)最高并呈逐年增高趨勢(shì)，室內(nèi)燃煤空氣污染是其主要致病因素，因此該地區(qū)肺癌病人樣本可以作為研究環(huán)境誘發(fā)肺癌機(jī)制的良好對(duì)象。通過(guò)對(duì)14對(duì)非小細(xì)胞肺癌病人組織DNA以及匹配癌旁組織DNA進(jìn)行高通量全基因組測(cè)序分析，發(fā)現(xiàn)大量與肺癌發(fā)生相關(guān)的突變、插入/缺失、染色體重排和拷貝數(shù)變化等。通過(guò)擴(kuò)大樣本驗(yàn)證，我們發(fā)現(xiàn)了一些該地區(qū)特有的突變基因，其中，通過(guò)siRNA干擾的方法沉默CACNA1E基因表達(dá)，能夠顯著抑制肺癌