人γδT細胞聯(lián)合小分子化合物抗肺腺癌活性的研究.pdf

1、目的：探究人γδT細胞及人γδT細胞聯(lián)合其他小分子化合物對肺腺癌的免疫治療的效果及可能的腫瘤細胞殺傷機制。
　　方法：首先，通過唑來膦酸（zoledronate，Zol）與白細胞介素-2（interleukin-2，IL-2）的共同刺激人外周血單個核細胞，獲得高純度的γδT細胞。并且利用實時細胞分析系統(tǒng)考察γδT細胞及γδT細胞聯(lián)合化合物的體外抑制A549細胞生長的能力。其次，建立BalB/c裸鼠荷瘤模型20只，分為4組，每組5只

2、。分別為，Control組：腹腔注射生理鹽水；順鉑組：腹腔注射順-二氯二氨合鉑(II)；γδT組：腹腔注射γδT細胞；聯(lián)合組：腹腔注射γδT細胞聯(lián)合本實驗室合成的菲咯啉類小分子化合物及c-Myc抗體，各組每周予以相應治療。至建模成功第45天處死所有裸鼠，檢測腫瘤質(zhì)量及體積并保存。最后，通過反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應（RT-PCR）和Western-blotting檢測腫瘤組織內(nèi)c-Myc、PD-1的mRNA和蛋白表達情況。
　　結(jié)果：在

3、Zol與IL-2共同刺激14天后，通過流式細胞分析系統(tǒng)檢測結(jié)果提示γδT細胞已具有較高純度。實時細胞分析結(jié)果表明γδT細胞對A549細胞具有較高的生長抑制作用，但γδT細胞聯(lián)合菲咯啉類小分子化合物抑制作用更明顯。通過對裸鼠腫瘤治療期間體重、腫瘤體積及解剖后腫瘤質(zhì)量的測量、記錄發(fā)現(xiàn)：（1）荷瘤裸鼠體重較健康裸鼠有一定程度減輕（p＜0.05），這表明移植瘤對裸鼠正常生理功能產(chǎn)生影響。（2）相較于Control組，γδT干預組裸鼠腫瘤體積和質(zhì)

4、量均較?。╬＜0.05），并且聯(lián)合干預組腫瘤體積和質(zhì)量更小。（3）通過RT-PCR及Western-blotting實驗，發(fā)現(xiàn)γδT干預組和聯(lián)合干預組腫瘤組織內(nèi)c-Myc、PD-1轉(zhuǎn)錄與蛋白表達水平較Control組均較低。
　　結(jié)論：γδT細胞及γδT細胞聯(lián)合菲咯啉類小分子化合物及c-Myc抗體在體內(nèi)外均表現(xiàn)出較強腫瘤細胞抑制作用，并且無論在體內(nèi)還是體外，γδT細胞聯(lián)合化合物表現(xiàn)出更強的腫瘤細胞抑制能力。其殺傷腫瘤細胞的機制可能