前列腺癌細(xì)胞系差異核基質(zhì)蛋白(NMPs)的鑒定研究.pdf

1、目的:本研究旨在應(yīng)用雙向電泳結(jié)合質(zhì)譜技術(shù)對前列腺增生細(xì)胞系BPH-1及前列腺癌雄激素依賴性細(xì)胞系LNCaP、前列腺癌雄激素非依賴性細(xì)胞系PC-3中差異表達(dá)的核基質(zhì)蛋白進(jìn)行分離、比較和鑒定，為人前列腺癌組織的NMPs的分離鑒定奠定基礎(chǔ)。
　　 方法:1、培養(yǎng)BPH-1、LNCaP和PC-3三種細(xì)胞并提取其細(xì)胞核基質(zhì)蛋白;2、利用雙向電泳結(jié)合質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)核心技術(shù)，分離、鑒定三種細(xì)胞系差異表達(dá)的核基質(zhì)蛋白;3、采用Western-

2、blot對差異蛋白進(jìn)行驗(yàn)證分析。
　　 結(jié)果:1、完成對三種細(xì)胞的培養(yǎng)，成功提取三種細(xì)胞核基質(zhì)蛋白，并找到具有差異表達(dá)的29個蛋白;質(zhì)譜鑒定總共鑒定出28個差異蛋白質(zhì)。2、選擇其中三個蛋白質(zhì)（hnRNPQ、Annexin A2和GRP78）用Western-blot進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果顯示GRP78在BPH-1細(xì)胞系中表達(dá)量最高，在LNCaP細(xì)胞系中表達(dá)量低，而在PC-3細(xì)胞系中表達(dá)缺失。Annexin A2在BPH-1細(xì)胞系中低表達(dá)

3、或不表達(dá)，在LNCaP細(xì)胞系中不表達(dá)，而在PC-3細(xì)胞系中又重新表達(dá)并且表達(dá)量增高。未檢測到hnRNPQ在細(xì)胞中的表達(dá)情況。
　　 結(jié)論:三種前列腺癌細(xì)胞系核基質(zhì)蛋白表達(dá)存在顯著性差異。GRP78和Annexin A2兩種蛋白已證明在癌變中具有重要意義，并有可能成為前列腺癌診斷的候選生物標(biāo)記物，對前列腺癌的發(fā)生發(fā)展機(jī)理的研究具有提示作用，并能為前列腺癌的診斷治療和抗癌藥物的研究提供新的靶向性蛋白，具有重要的實(shí)踐意義。由于hnRN