前列腺癌細胞系差異核基質(zhì)蛋白(NMPs)的鑒定研究.pdf

1、目的:本研究旨在應(yīng)用雙向電泳結(jié)合質(zhì)譜技術(shù)對前列腺增生細胞系BPH-1及前列腺癌雄激素依賴性細胞系LNCaP、前列腺癌雄激素非依賴性細胞系PC-3中差異表達的核基質(zhì)蛋白進行分離、比較和鑒定，為人前列腺癌組織的NMPs的分離鑒定奠定基礎(chǔ)。
　　 方法:1、培養(yǎng)BPH-1、LNCaP和PC-3三種細胞并提取其細胞核基質(zhì)蛋白;2、利用雙向電泳結(jié)合質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)核心技術(shù)，分離、鑒定三種細胞系差異表達的核基質(zhì)蛋白;3、采用Western-

2、blot對差異蛋白進行驗證分析。
　　 結(jié)果:1、完成對三種細胞的培養(yǎng)，成功提取三種細胞核基質(zhì)蛋白，并找到具有差異表達的29個蛋白;質(zhì)譜鑒定總共鑒定出28個差異蛋白質(zhì)。2、選擇其中三個蛋白質(zhì)（hnRNPQ、Annexin A2和GRP78）用Western-blot進行驗證。結(jié)果顯示GRP78在BPH-1細胞系中表達量最高，在LNCaP細胞系中表達量低，而在PC-3細胞系中表達缺失。Annexin A2在BPH-1細胞系中低表達

3、或不表達，在LNCaP細胞系中不表達，而在PC-3細胞系中又重新表達并且表達量增高。未檢測到hnRNPQ在細胞中的表達情況。
　　 結(jié)論:三種前列腺癌細胞系核基質(zhì)蛋白表達存在顯著性差異。GRP78和Annexin A2兩種蛋白已證明在癌變中具有重要意義，并有可能成為前列腺癌診斷的候選生物標記物，對前列腺癌的發(fā)生發(fā)展機理的研究具有提示作用，并能為前列腺癌的診斷治療和抗癌藥物的研究提供新的靶向性蛋白，具有重要的實踐意義。由于hnRN