腸道缺血再灌注致遠(yuǎn)隔組織損傷時TLR4與HMGB1及下游信號途徑的研究.pdf

1、目的:應(yīng)用不同的抗體蛋白研究小鼠腸道缺血/再灌注致遠(yuǎn)隔組織損傷時，TLR4-HMGB1及其下游信號途徑的作用。
　　方法:SPF級雄性C57BL/6小鼠40只，隨機分為5組:sham、control、anti-HMGB1、anti-MyD88和anti-TRIF，每組8只。Control、anti-HMGB1、anti-MyD88和anti-TRIF組在行腸道缺血/再灌注手術(shù)前30min分別經(jīng)尾靜脈注射對照IgG、HMGB1、My

2、D88和TRIF抗體（劑量為1mg/kg，濃度為0.025％）。所有小鼠麻醉，開腹后，鈍性分離暴露腸系膜上動脈（superior mesenteric artery，SMA）。除sham組外的四組用無創(chuàng)血管夾夾閉腸系膜上動脈60min后松夾再灌注60min，sham組只開腹120min，不進行缺血再灌注。術(shù)后取材，檢測血漿NF-κB p65、IL-6及TNF-α濃度;肺臟和肝臟MPO的活性;肺和腸道組織形態(tài)學(xué)變化和HMGB1與NF-κB

3、的mRNA和蛋白表達(dá)。應(yīng)用單因素方差分析檢驗進行統(tǒng)計學(xué)處理。
　　結(jié)果:在小鼠腸道缺血再灌注損傷中，與對照組比較，在缺血前通過注射抗體阻斷HMGB1、MyD88和TRIF的表達(dá)能明顯的降低血漿炎癥因子NF-κB、IL-6及TNF-α的水平，同時減輕了肺臟和小腸組織的損傷。anti-HMGB1抗體、anti-MyD88抗體和anti-TRIF抗體的應(yīng)用能明顯的減輕缺血再灌注引起的組織損傷，提示了其治療性的作用，其中anti-HMGB