在“組學(xué)”水平上富集鋅指蛋白.pdf

1、蛋白質(zhì)組學(xué)是在“組學(xué)”尺度上研究蛋白質(zhì)，可以提供蛋白質(zhì)含量、位置、化學(xué)修飾以及蛋白質(zhì)相互作用全面而有用的信息，這些信息互補(bǔ)而又不同于基因組學(xué)。所有這些信息可被用來(lái)研究疾病機(jī)理，開(kāi)發(fā)新型藥物，發(fā)展疾病診斷新型生物標(biāo)志物，以及鑒定新的治療靶標(biāo)。 大多數(shù)鋅指蛋白可以選擇性結(jié)合特定的DNA序列，控制基因轉(zhuǎn)錄以及影響人類(lèi)癌癥發(fā)生。在蛋白質(zhì)組水平上研究鋅指蛋白可以認(rèn)識(shí)鋅指蛋白在細(xì)胞內(nèi)的各種生理功能，在影響人類(lèi)癌癥發(fā)生過(guò)程中的作用機(jī)理，進(jìn)而可

2、以發(fā)展用于診斷的生物標(biāo)志物以及開(kāi)發(fā)用于癌癥治療的新藥物。 然而，作為轉(zhuǎn)錄因子超級(jí)家族，鋅指蛋白屬于低豐度蛋白，在蛋白質(zhì)分析前需要進(jìn)行富集?；阡\指蛋白的結(jié)構(gòu)特性，本文設(shè)計(jì)并討論了三種鋅指蛋白富集方法，分別稱(chēng)為“線”，“面”以及“空間”富集法。實(shí)驗(yàn)部分驗(yàn)證了鋅指結(jié)構(gòu)對(duì)半胱氨酸的保護(hù)能力，以及優(yōu)化了“線”富集法的操作條件，為實(shí)際樣品中富集鋅指蛋白提供有用參考。 基于實(shí)驗(yàn)結(jié)果，得到以下優(yōu)化條件：酸性pH值使得鋅離子易于脫離；緩