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1、蛋白質(zhì)組學(xué)是在“組學(xué)”尺度上研究蛋白質(zhì),可以提供蛋白質(zhì)含量、位置、化學(xué)修飾以及蛋白質(zhì)相互作用全面而有用的信息,這些信息互補而又不同于基因組學(xué)。所有這些信息可被用來研究疾病機理,開發(fā)新型藥物,發(fā)展疾病診斷新型生物標(biāo)志物,以及鑒定新的治療靶標(biāo)。 大多數(shù)鋅指蛋白可以選擇性結(jié)合特定的DNA序列,控制基因轉(zhuǎn)錄以及影響人類癌癥發(fā)生。在蛋白質(zhì)組水平上研究鋅指蛋白可以認(rèn)識鋅指蛋白在細胞內(nèi)的各種生理功能,在影響人類癌癥發(fā)生過程中的作用機理,進而可
2、以發(fā)展用于診斷的生物標(biāo)志物以及開發(fā)用于癌癥治療的新藥物。 然而,作為轉(zhuǎn)錄因子超級家族,鋅指蛋白屬于低豐度蛋白,在蛋白質(zhì)分析前需要進行富集?;阡\指蛋白的結(jié)構(gòu)特性,本文設(shè)計并討論了三種鋅指蛋白富集方法,分別稱為“線”,“面”以及“空間”富集法。實驗部分驗證了鋅指結(jié)構(gòu)對半胱氨酸的保護能力,以及優(yōu)化了“線”富集法的操作條件,為實際樣品中富集鋅指蛋白提供有用參考。 基于實驗結(jié)果,得到以下優(yōu)化條件:酸性pH值使得鋅離子易于脫離;緩
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