黃芪、大黃影響大鼠腎MsC增生及表達TGF-β1的比較研究.pdf

1、目的：通過觀察黃芪、大黃對脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)誘導(dǎo)下體外培養(yǎng)的大鼠腎小球系膜細胞(primarymesangialcells,MsC)增生的影響及對MsC表達轉(zhuǎn)化生長因子β1(Transforminggrowthfactor–β1,TGF–β1)的影響,探討黃芪、大黃對腎小球系膜細胞增殖的抑制效果。
　　方法：培養(yǎng)及鑒定大鼠原代腎小球系膜細胞,并用于實驗:首先提取大鼠腎小球并用Ⅳ型膠原酶消化處理,

2、然后體外培養(yǎng)大鼠腎小球,對生長的細胞定期行光鏡及免疫組化等鑒定。在細胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)上,利用脂多糖誘發(fā)大鼠腎小球系膜細胞增生模型,將系膜細胞分為控制組、模型組、對照組、黃芪組、大黃組、雷公藤多甙組,通過MTT法檢測黃芪、大黃對MsC增殖的影響;采用ELISA法檢測黃芪、大黃對MsC表達TGF–β1的影響。
　　結(jié)果：培養(yǎng)的腎小球3d后可見到有細胞生長,14d時鏡下細胞多呈短梭形,28d時細胞生長密集,呈星射狀或紡錘形,免疫組化示結(jié)蛋白

3、陽性。模型組MsC增生活躍,OD值明顯高于控制組(P<0.01或P<0.05);模型組TGF-β1含量明顯升高,與控制組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),說明造模成功。中藥黃芪、大黃均能抑制MsC的增殖,降低對TGF-β1過表達,12h以黃芪抑制作用較強,24h以大黃抑制作用較強,48h兩者相比無顯著性差異。
　　結(jié)論：培養(yǎng)的細胞為大鼠腎小球系膜細胞;中藥黃芪、大黃均能夠抑制體外培養(yǎng)的大鼠腎小球系膜細胞的增殖,能抑制MsC對T