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文檔簡介
1、本文對牛羊腐蹄病壞死梭桿菌白細胞毒素重組亞單位疫苗進行了研究。主要內(nèi)容如下: 1.采用PCR方法設(shè)計五段彼此相互重疊、覆蓋全長F. necrophorum白細胞毒素基因(lktA)的引物,從F. necrophorum A25菌株(羊源)和H05(牛源)菌株中分別擴增了lktA基因(lktA1、lktA2、lktA3、lktA4和lktA5),測序、拼接后與GenBank發(fā)表的F. necrophorum A25菌株白細胞毒素基
2、因核甘酸序列進行比對分析。 2.利用pET-28a、pET-30a、pET-32a、pQE30、pPRO-EX-HTa和pGEX-6p-1原核表達載體構(gòu)建了一系列表達5個截短F. necrophorum lktA基因的重組質(zhì)粒,陽性質(zhì)粒轉(zhuǎn)化E. coli BL21(DE3)或E. coli Rosetta<'TM>(plyss)后,用IPTG進行誘導(dǎo)表達。 3.將PL1重組蛋白(疫苗Ⅰ)、PL2重組蛋白(疫苗Ⅱ)、lkt
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