人胎肝肝實質(zhì)細胞二維電泳與中醫(yī)肝臟功能理論探討.pdf

1、本研究依次從組織和細胞層面對20周孕齡人胎肝的發(fā)育程度和蛋白質(zhì)信息進行探討.我們先在組織層次上從形態(tài)學角度闡述20周孕齡入胎肝的發(fā)育程度,以便對所提取的蛋白質(zhì)組成成分進行功能分析,所采用的技術(shù)手段是HE染色.HE染色是最常用的組織化學染色方法,可以檢測組織和細胞基本形態(tài)結(jié)構(gòu),實驗結(jié)果說明20周孕齡人胎肝組織肝小葉和肝細胞板已基本形成,肝小葉之間可見初級和次級匯管區(qū),肝細胞索呈單行或雙行排列,肝竇內(nèi)充滿不成熟的造血細胞.可見20周孕齡人胎

2、肝是處于發(fā)育中期的器官.其次,我們對20周孕齡的人胎肝肝實質(zhì)細胞進行提取和細胞內(nèi)全部表達的蛋白質(zhì)進行分離,以了解胎肝細胞內(nèi)所表達的蛋白質(zhì)的信息.肝實質(zhì)細胞提取過程中,肝實質(zhì)細胞易破碎和純度較低是研究的瓶頸,我們構(gòu)建了以冷凍凝集為基礎的肝實質(zhì)細胞提取技術(shù)平臺,使提取的肝實質(zhì)細胞的純度達到95.3﹪.為了分析肝實質(zhì)細胞內(nèi)全部蛋白質(zhì)信息,我們采用了二維電泳技術(shù)將肝實質(zhì)細胞內(nèi)全部蛋白質(zhì)進行分離,并通過優(yōu)化肝實質(zhì)細胞裂解方法、凝膠制備方法、一向等