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1、目的:探討間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)在成骨分化過(guò)程中的免疫原性改變及其分子機(jī)制。
方法:用酶消化法獲得人胎盤(pán)源間充質(zhì)干細(xì)胞(PMSCs),并對(duì)其進(jìn)行鑒定后,分別在體外和體內(nèi)條件下,誘導(dǎo)其成骨分化。體內(nèi)外成骨誘導(dǎo)7天后用流式細(xì)胞術(shù)(FCA)分別檢測(cè)細(xì)胞表面協(xié)同刺激分子的表達(dá)情況;同時(shí)用成骨誘導(dǎo)后的細(xì)胞分別與T細(xì)胞共培養(yǎng),3H-TdR摻入法或CCK8方法檢測(cè)T細(xì)胞的增殖。利用茜素紅染色、ALP活性檢測(cè)、micro-CT、H&E染色等
2、方法檢測(cè)MSCs體內(nèi)外成骨效應(yīng),分析成骨效應(yīng)。
結(jié)果:1)成功分離培養(yǎng)PMSCs;2)體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)均顯示PMSCs成功向成骨細(xì)胞分化,未分化的PMSCs不表達(dá)CD28、CD80、CD83、CD86、B7DC等正性共刺激分子,但經(jīng)成骨誘導(dǎo)分化后其表達(dá)上調(diào);并且成骨誘導(dǎo)分化后的PMSCs促進(jìn)了T細(xì)胞增殖,而未誘導(dǎo)分化的PMSCs則未能促進(jìn);3)PMSCs在體內(nèi)成骨分化后 CD28、CD80、CD83、CD86、B7DC等正性共刺激分
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