Reelin和B7-H3分子在多發(fā)性骨髓瘤中的表達(dá)及預(yù)后意義.pdf

1、目的：通過研究骨髓瘤細(xì)胞株及多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)患者CD138+骨髓瘤細(xì)胞中Reelin和B7-H3分子的表達(dá)水平，并與臨床資料相結(jié)合分析，探索Reelin和B7-H3分子在多發(fā)性骨髓瘤中的預(yù)后意義。
　　方法：1.Reelin的檢測(1)骨髓瘤細(xì)胞株中Reelin的檢測:RT-PCR方法檢測3種細(xì)胞株Reelin分子的表達(dá)，GAPDH為內(nèi)參對照;(2)MM患者CD138+骨髓瘤細(xì)胞中Reelin

2、的檢測:提取骨髓中單個(gè)核細(xì)胞(Mononuclear cells，MC)，標(biāo)記CD138 PE抗體，流式分選出CD138+骨髓瘤細(xì)胞，行實(shí)時(shí)定量PCR，以骨髓瘤細(xì)胞株Reelin表達(dá)量為對照，檢測Reelin的相對表達(dá)量。2.B7-H3的檢測(1)骨髓瘤細(xì)胞株B7-H3的檢測:RT-PCR方法檢測細(xì)胞株B7-H3分子的表達(dá)，GAPDH作為內(nèi)參對照;細(xì)胞株標(biāo)記Anti-Human B7-H3 PE抗體，流式檢測B7-H3陽性率，設(shè)立Ant

3、i-IgG1-PE為同型對照;IL-6刺激細(xì)胞株B7-H3的檢測;重組人IL-6刺激骨髓瘤細(xì)胞株72小時(shí)，標(biāo)記B7-H3 PE抗體，流式檢測，Anti-IgG1-PE為同型對照;(2)MM患者CD138+骨髓瘤細(xì)胞中B7-H3的檢測:提取MC，標(biāo)記B7-H3PE和CD138 APC抗體，流式檢測CD138+B7-H3+、CD138+B7-H3-分子的表達(dá)比例。3.Reelin與B7-H3分子在MM患者CD138+骨髓瘤細(xì)胞中表達(dá)的相關(guān)性

4、分析。
　　結(jié)果：1.骨髓瘤細(xì)胞株H929高表達(dá)Reelin，RPMI8226和U266低表達(dá)Reelin;而B7-H3恰相反;外源IL-6刺激骨髓瘤細(xì)胞株未見B7-H3分子的上調(diào)。2.MM患者骨髓中能分選出一定量的CD138+骨髓瘤細(xì)胞，且Reelin和B7-H3在患者中差異性表達(dá)。3.CD138+骨髓瘤細(xì)胞比例與Reelin表達(dá)水平無相關(guān)性(r=0.179，P=0.345)。不同病程組間及組內(nèi)Reelin表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=

5、0.209);CD138+骨髓瘤細(xì)胞Reelin的表達(dá)與年齡、性別、分期及是否髓外病變差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與預(yù)后（無疾病進(jìn)展期）有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.033)。4.流式檢測初診與緩解MM的B7-H3陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.023）;緩解與復(fù)發(fā)的B7-H3陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.004);B7-H3高表達(dá)較低表達(dá)的患者具有更多的骨質(zhì)破壞(P=0.027)，血清鈣離子差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.046)。5.Reelin與B7-