體外誘導(dǎo)獲得雪旺氏細(xì)胞的可靠性研究.pdf

1、脊髓損傷（spinalcordinjury，SCI）是一種嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)創(chuàng)傷。隨著社會(huì)的進(jìn)步，主要由交通事故和墜落傷引起的脊柱骨折所致的SCI有逐年上升的趨勢。SCI給家庭、社會(huì)均帶來沉重的負(fù)擔(dān)。傳統(tǒng)觀念認(rèn)為哺乳動(dòng)物的腦和脊髓損傷后不能再生，脊髓損傷后功能恢復(fù)的希望渺茫。但近年來的實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，中樞神經(jīng)損傷后具有一定的再生能力，隨后人們逐漸認(rèn)識(shí)到中樞神經(jīng)系統(tǒng)再生能力有限主要是因?yàn)榫植课h(huán)境不適宜。SCI修復(fù)面臨的主要問題是：（1）形成的

2、脊髓空洞、膠質(zhì)瘢痕成為阻礙軸突生長的機(jī)械屏障；（2）原發(fā)和繼發(fā)的神經(jīng)元凋亡，使脊髓缺乏自我修復(fù)能力；（3）神經(jīng)營養(yǎng)因子缺乏；（4）損傷局部存在抑制軸突再生的因素如Nogo、髓磷脂相關(guān)糖蛋白等。近年來，細(xì)胞移植在實(shí)驗(yàn)性SCI的治療中顯示了良好的效果，給SCI的治療帶來了新的希望。細(xì)胞移植可以通過改變SCI后的病理過程從而促進(jìn)脊髓功能恢復(fù)，主要包括：（1）移植物可填充損傷部位并形成細(xì)胞橋，從而為損傷軸突的再生提供機(jī)械或生物通道；（2）分泌生

3、長因子，為軸突或神經(jīng)元再生提供必要條件；（3）替代或提供新的神經(jīng)元從而形成新的神經(jīng)環(huán)路。由于細(xì)胞移植能通過自身的橋接作用恢復(fù)嚴(yán)重脊髓損傷所造成的組織缺損，同時(shí)提供軸突再生所需要的神經(jīng)營養(yǎng)因子、細(xì)胞外基質(zhì)和黏附因子，該方法在大量的實(shí)驗(yàn)研究中被采用。目前細(xì)胞移植研究較多應(yīng)用的有雪旺氏細(xì)胞（Schwanncell，SCs）、嗅鞘細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞、骨髓基質(zhì)干細(xì)胞及臍血干細(xì)胞等。 SCs作為外周神經(jīng)系統(tǒng)中特有的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，它起源于神經(jīng)脊

4、（neuralcrest），隨神經(jīng)軸突的生長而同步增殖和遷移，并包繞有髓神經(jīng)纖維形成髓鞘，從而支持和營養(yǎng)神經(jīng)纖維。在有髓神經(jīng)纖維中，一個(gè)SCs包繞一根軸突；而在無髓神經(jīng)纖維中一個(gè)SCs可包繞多根軸突。SCs具有同質(zhì)性（homogeneous），即不同部位SCs的細(xì)胞學(xué)特性基本相同。當(dāng)神經(jīng)軸突受到損傷時(shí)，產(chǎn)生華勒氏變性（Walleriandegeneration），損傷遠(yuǎn)端的SCs大量增殖并包繞再生軸突，完成髓鞘化后修復(fù)損傷的神經(jīng)軸突。S

5、Cs作為神經(jīng)系統(tǒng)損傷最重要的組織工程種子細(xì)胞之一，在神經(jīng)系統(tǒng)損傷修復(fù)研究中起著重要作用。 盡管SCs是外周神經(jīng)的主要結(jié)構(gòu)和功能細(xì)胞，對(duì)神經(jīng)再生和功能的恢復(fù)起著重要作用。但SCs屬于終末細(xì)胞，難以進(jìn)行有絲分裂，很難獲得足夠的雪旺細(xì)胞，又由于其具有抗原性，因此限制了其在外周神經(jīng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的修復(fù)和治療過程中的應(yīng)用。2001年Dezawa等采用骨髓基質(zhì)細(xì)胞（bonemarrowstromalcells，BMSCs）在體外誘導(dǎo)分化為

6、雪旺氏細(xì)胞樣細(xì)胞。這種誘導(dǎo)得到的細(xì)胞（differentiatedbonemarrowstromalcells，dBMSCs）表達(dá)雪旺氏細(xì)胞的特異表面蛋白p75、S100、GFAP。但dBMSCs和外周神經(jīng)來源的SCs形態(tài)上并不完全一致，其誘導(dǎo)完成后的細(xì)胞生長、增值能力和能否保持誘導(dǎo)后狀態(tài)以及分泌神經(jīng)營養(yǎng)因子的能力等情況尚未有文獻(xiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)以SCs為陽性對(duì)照通過對(duì)體外誘導(dǎo)大鼠BMSCs向SCs方向轉(zhuǎn)化的各個(gè)階段進(jìn)行了相關(guān)指標(biāo)的檢測，并