非諾貝特對碘酸鈉誘導的視網(wǎng)膜變性的保護作用.pdf

1、目的：研究非諾貝特在碘酸鈉誘導的視網(wǎng)膜變性的保護作用，并探討其可能的作用機制。
　　方法：
　?。?）細胞實驗：選取人視網(wǎng)膜色素上皮細胞穩(wěn)定細胞系（ARPE-19），采用不同濃度碘酸鈉刺激細胞，確定本實驗碘酸鈉刺激濃度。采取不同濃度非諾貝特預處理細胞2小時，使用確定濃度的碘酸鈉處理細胞24小時后收集細胞，檢測凋亡相關指標的變化。
　?。?）動物實驗：雄性C57BL/6小鼠尾靜脈注射碘酸鈉溶液（50mg/kg）誘導視網(wǎng)膜

2、變性。對小鼠飼予含0.1％非諾貝特飼料預處理3天，經碘酸鈉尾靜脈注射3天后處死小鼠，取眼球組織檢測視網(wǎng)膜細胞變性凋亡相關蛋白表達，Müller細胞反應性膠質化及炎癥細胞變化。
　　結果：
　?。?）細胞實驗：在ARPE-19細胞中，非諾貝特預處理組與單純碘酸鈉處理組相比，TUNEL陽性細胞數(shù)具有顯著性差異（P＜0.01），蛋白印跡與免疫熒光結果顯示，caspase3的表達顯著降低，MTT結果顯示非諾貝特顯著提高細胞活性。

3、r>　?。?）動物實驗：碘酸鈉（50mg/kg）靜脈注射后，TUNEL染色發(fā)現(xiàn)視網(wǎng)膜細胞凋亡明顯增加，呈時間依賴性，第三天達到細胞凋亡高峰。Muller細胞反應性膠質化與細胞凋亡結果相一致。非諾貝特干預組與單純碘酸鈉注射組比較，TUNEL陽性細胞數(shù)具有顯著性差異（P＜0.01）。免疫熒光顯示，非諾貝特處理組與碘酸鈉注射組比較，活化的半胱天冬酶蛋白 caspase3表達量顯著降低，下調膠質纖維酸性蛋白GFAP表達量，炎癥反應相關蛋白CD1