胞內(nèi)勞森菌IPMA抗體檢測(cè)方法的建立及豬源性胞內(nèi)勞森菌在小鼠體內(nèi)的復(fù)制.pdf

1、豬增生性腸炎（porcine proliferative enteritis，PPE），叉叫回腸炎，發(fā)生于生長(zhǎng)和育肥階段的豬，是一個(gè)重要的傳染性腸道疾病。它是一種傳染性腸道疾病，能引起豬生長(zhǎng)發(fā)育阻滯，PPE由胞內(nèi)勞森菌（lawsonia intracellularis，LI）引起，主要感染部位為豬的回腸和結(jié)腸，引起這些部位粘膜的增厚，進(jìn)而造成養(yǎng)豬業(yè)料肉比下降而造成重大經(jīng)濟(jì)損失。胞內(nèi)勞森菌是由三層波狀的胞膜結(jié)構(gòu)組成，以二分裂方式在回腸上皮

2、細(xì)胞胞漿內(nèi)復(fù)制，一般彎曲狀、逗點(diǎn)狀或S形，革蘭氏染色陰性，嚴(yán)格胞內(nèi)寄生。目前國(guó)內(nèi)對(duì)胞內(nèi)勞森菌臨床感染情況的相關(guān)研究報(bào)道不多，有必要對(duì)LI引發(fā)的PPE進(jìn)行進(jìn)一步研究。現(xiàn)將本文研究?jī)?nèi)容簡(jiǎn)述如下:
　　1.胞內(nèi)勞森菌IPMA抗體檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用
　　本試驗(yàn)探索并建立了胞內(nèi)勞森菌IPMA抗體檢測(cè)方法，摸索了該方法的最佳HRP-ProteinA工作濃度為1∶2000，最佳孵育時(shí)間為1h，底物顯色最佳時(shí)間為15min。該方法特異性好

3、、敏感性強(qiáng)、操作流程方便，適用于胞內(nèi)勞森菌抗體的檢測(cè)。為L(zhǎng)I疫苗免疫效果的評(píng)價(jià)、流行病學(xué)調(diào)查及相關(guān)檢疫提供了一種技術(shù)手段。
　　2.上海地區(qū)規(guī)模化養(yǎng)豬場(chǎng)PPE感染情況初探
　　本試驗(yàn)對(duì)上海地區(qū)規(guī)?；B(yǎng)豬場(chǎng)PPE感染情況進(jìn)行初步探索，臨床采集的255份臨床回腸樣本、新鮮糞便和肛門(mén)拭子中，常規(guī)PCR檢測(cè)到36份樣本呈現(xiàn)胞內(nèi)勞森菌陽(yáng)性（陽(yáng)性率為14.1％），IPMA抗體檢測(cè)結(jié)果顯示，在采集的504份血清中，56份血清胞內(nèi)勞森菌陽(yáng)性

4、（陽(yáng)性率11.1％），表明上海地區(qū)規(guī)模化養(yǎng)豬場(chǎng)豬群中普遍存在胞內(nèi)勞森菌感染。結(jié)果顯示嘉定區(qū)PPE感染程度較高，松江和奉賢次之，崇明感染程度最低，這可能是由于崇明四周海域的地理環(huán)境優(yōu)勢(shì)所致。檢測(cè)結(jié)果顯示育肥豬與公母豬感染情況相比，公母豬陽(yáng)性率略高于育肥豬，可能是與育肥豬的抗生素類(lèi)藥物使用較公母豬高所致，也可能是公母豬生長(zhǎng)周期較育肥豬長(zhǎng)，感染風(fēng)險(xiǎn)大于育肥豬所致。夏季PPE病例較多，其次是春季，可以反應(yīng)出胞內(nèi)勞森菌感染發(fā)病的主要季節(jié)集中在春夏

5、兩季。比較兩種方法，在今后的臨床檢測(cè)中可根據(jù)需要選擇不同的方法檢測(cè)。
　　3.豬源性胞內(nèi)勞森菌在小鼠體內(nèi)的復(fù)制
　　本研究通過(guò)試驗(yàn)，在小鼠體內(nèi)成功復(fù)制豬源性胞內(nèi)勞森菌，表明豬源性胞內(nèi)勞森菌可以在嚙齒類(lèi)動(dòng)物小鼠體內(nèi)繁殖，鼠類(lèi)能夠因直接接觸感染豬的糞便而被自然感染。試驗(yàn)組感染小鼠無(wú)死亡，表明豬源性胞內(nèi)勞森菌雖然對(duì)小鼠致病，但是不具有致死性。感染胞內(nèi)勞森菌的小鼠體重?zé)o明顯變化。LI在小鼠的致病部位主要在回腸及十二指腸，LI在其他臟