細(xì)胞轉(zhuǎn)動肽R8和Sec修飾納米粒用于蛋白多肽口服給藥的研究.pdf

1、本項目采用三種細(xì)胞轉(zhuǎn)運肽--R8、非經(jīng)典分泌肽Sec和Sec-R8對納米粒進行修飾，提高載藥納米粒在腸道壁細(xì)胞中的跨胞轉(zhuǎn)運效率，從而促進多肽與蛋白質(zhì)在消化道內(nèi)的吸收。本文用Fmoc固相合成法人工合成細(xì)胞轉(zhuǎn)運肽R8、Sec和Sec-R8，用葡聚糖凝膠SephadexG-25凝膠過濾層析進行分離純化，再用高效液相色譜法和質(zhì)譜鑒定確定目標(biāo)肽；選用熒光標(biāo)記的水溶性藥物葡聚糖為模型藥物，用PLGA為載體材料復(fù)乳法制備PLGA納米粒，運用單因素考察

2、和正交設(shè)計優(yōu)化納米粒的最佳處方，再用三種轉(zhuǎn)運肽分別修飾納米粒；取大鼠空腸做體外腸粘膜轉(zhuǎn)運實驗，實驗所加的樣品分別為游離藥物FD4-葡聚糖、載藥納米粒和細(xì)胞穿透肽修飾的載藥納米粒(兩種修飾方法，方法一，先制備納米粒，再連接轉(zhuǎn)運肽；方法二，先合成PLGA-CPP偶聯(lián)化合物，再制備納米粒)，用熒光分光光度法測透過藥物濃度，計算表觀滲透系數(shù)(Papp)，比較游離藥物、載藥納米粒、穿透肽修飾納米粒的轉(zhuǎn)運效果。
　　 本實驗中純化后的三種目

3、標(biāo)肽純度均達(dá)到了95％以上，符合實驗要求。按優(yōu)化條件藥物濃度1mg/ml，PLGA濃度4％，PVA濃度1％，超聲功率150W，制得分布均勻、形態(tài)圓整、平均粒徑203nm，包封率68.5％，Zeta值-9.513mV(n=3)的載藥納米粒。通過6小時的大鼠腸道通透實驗可以得出：與游離藥物相比，用載藥納米粒在腸道粘膜上的表觀滲透系數(shù)(Papp)可從3.3×10-6cm/s提高到20.0×10-6cm/s，累積滲透量可增加5倍，表現(xiàn)了納米粒可