食物蛋白穩(wěn)定化口服納米給藥系統(tǒng)及其“固態(tài)化”.pdf

1、難溶性藥物的口服給藥一直是藥劑學(xué)領(lǐng)域研究的重點和難點，低溶解度除了造成口服吸收差、生物利用度低的問題外，還可能引起個體間藥效差異大和藥效-劑量不成比例等問題，已成為制約其發(fā)展的關(guān)鍵因素之一。采用納米技術(shù)可顯著提高難溶性藥物的溶解度，促進跨膜吸收，具有良好的發(fā)展前景。然而，納米給藥系統(tǒng)如納米乳等在制備過程中需使用一定量的表面活性劑，往往占油相的20-30％，這些表面活性劑對機體都有潛在的毒性;再者，納米給藥體系在水性環(huán)境中不穩(wěn)定，容易發(fā)生

2、粒子間聚集、相分離、融合和藥物氧化、水解等，難以長期保存;另一方面，納米給藥體系的“固態(tài)化”是提高其穩(wěn)定性和實現(xiàn)長期保存的理想方法，但多數(shù)納米給藥體系難以直接固體化。因此，本文的目的在于尋找更加高效且無毒的納米給藥系統(tǒng)穩(wěn)定劑，并利用穩(wěn)定劑本身的理化特性，實現(xiàn)對納米給藥系統(tǒng)的固體化。本文利用三種對人體無毒無害的食物蛋白，大豆分離蛋白(SPI)/乳清分離蛋白(WPI)/beta-乳球蛋白(β-LG)，構(gòu)建包含難溶性藥物的納米乳、以該納米乳為

3、模板的殼交聯(lián)化納米囊和納米結(jié)晶遞藥系統(tǒng)，并對這些遞藥系統(tǒng)進行“固態(tài)化”以提高其穩(wěn)定性和實現(xiàn)長期保存。
　　利用高速剪切-高壓均質(zhì)法制備了SPI/WPI/β-LG穩(wěn)定化非諾貝特納米乳;以粒徑、多分散系數(shù)、zeta-電位和穩(wěn)定常數(shù)為指標，考察了制備工藝條件、食物蛋白濃度、油/水比例、水相pH值對處方的影響，同時進行了和常用表面活性劑乳化能力的比較實驗和細胞毒性考察。SPI、WPI和β-LG可以很好地穩(wěn)定納米乳，粒徑約為200nm，其乳

4、化能力和生物相容性要優(yōu)于考察的常用表面活性劑;食物蛋白的濃度、水相pH值和均質(zhì)壓力和循環(huán)次數(shù)明顯影響納米乳的粒徑、離心穩(wěn)定性和zate-電位。大鼠體內(nèi)口服生物利用度研究表明，三種食物蛋白穩(wěn)定化納米乳可以顯著促進難溶藥物的口服吸收。這些生物相容性理想的食物蛋白可以替代傳統(tǒng)表面活性劑構(gòu)建納米乳。
　　以SPI/WPI/β-LG穩(wěn)定化納米乳為模板，非諾貝特為模型藥物，采用將交聯(lián)劑鈣離子加入內(nèi)油相的界面交聯(lián)化方式制備納米囊。制備方法為高速

5、剪切-高壓均質(zhì)法，在該過程中納米乳模板的生成和交聯(lián)化納米囊的產(chǎn)生是同步的;對影響交聯(lián)化的水相pH值和交聯(lián)劑鈣離子濃度進行了考察，并對其交聯(lián)化機理進行了初步探討;交聯(lián)化納米粒子抗十二烷基硫酸鈉破壞作用明顯提高;該納米系統(tǒng)具有良好的載藥能力和理想的包封率;細胞毒性實驗表明殼交聯(lián)化過程沒有影響該系統(tǒng)的生物相容性。利用這些食物蛋白穩(wěn)定化納米乳為模板和本實驗的交聯(lián)技術(shù)，成功構(gòu)建了一種新的納米囊載藥系統(tǒng)。該制備方法簡單、易于重現(xiàn)，納米乳模板的生成和

6、殼交聯(lián)化可以同步進行。
　　采用凍干和流化床技術(shù)對殼交聯(lián)化SPI/WPI/β-LG納米囊混懸液進行“固態(tài)化”。納米囊混懸液凍干時不加任何保護劑;而采用流化床進行“固態(tài)化”時，以PVPk30為成膜材料，并和納米囊混懸液直接混合后層積于小丸表面;對“固態(tài)化”后的納米粒子進行了以粒徑和粒子形態(tài)為指標的再分散實驗，并利用PXRD/DSC評價了“固態(tài)化”后納米粒子中藥物物態(tài)。結(jié)果表明“固態(tài)化”后的納米囊可以再分散于水中，并復(fù)原到其原始粒徑和

7、形態(tài);物態(tài)鑒別實驗表明，納米囊在“固態(tài)化”過程中，沒有藥物析出，藥物依然被很好地包載于固態(tài)納米囊中。這些殼交聯(lián)化SPI/WPI/β-LG納米囊混懸液可以采用凍干和流化床技術(shù)實現(xiàn)“固態(tài)化”，對于其穩(wěn)定性的改善和實現(xiàn)長期保存具有重要意義。
　　采用超聲-共沉淀法制備了SPI/WPI/β-LG穩(wěn)定化吲哚美辛納米結(jié)晶，并考察了制備工藝條件、食物蛋白濃度、水相pH值和藥物濃度對處方的影響。掃描電鏡和透射電鏡結(jié)果表明，SPI/WPI/β-LG

8、穩(wěn)定化吲哚美辛納米結(jié)晶的粒徑為200-600hm，形態(tài)為針狀;這些蛋白對吲哚美辛納米結(jié)晶的穩(wěn)定化能力要強于所考察的普通穩(wěn)定劑;高溫變性過程可以提高食物蛋白的穩(wěn)定化能力;SPI/WPI/β-LG穩(wěn)定化納米結(jié)晶的形成明顯加快了藥物的溶出;通過熒光發(fā)射光譜實驗表明，變性蛋白和藥物晶體之間存在強烈的相互作用，初步認為其對納米結(jié)晶的穩(wěn)定機理為空間立體穩(wěn)定化效應(yīng)和靜電排斥作用的結(jié)合。
　　采用凍干和流化床技術(shù)對SPI/WPI/β-LG穩(wěn)定化吲

9、哚美辛納米結(jié)晶混懸液進行“固態(tài)化”。凍干時加入的凍干保護劑為海藻糖;流化床層積時，加入的保護劑為食物蛋白SPI和海藻糖，成膜材料為PVPK30;“固態(tài)化”后的納米結(jié)晶可以很好地再分散于水中，并復(fù)原其粒徑和形態(tài)。XRD和DSC鑒別實驗表明，藥物納米結(jié)晶為無定形態(tài)存在，并且在“固態(tài)化”過程中沒有改變其無定形態(tài)。
　　本文成功地利用三種食物蛋白為穩(wěn)定劑進行了口服納米乳、納米囊和納米結(jié)晶遞藥系統(tǒng)的構(gòu)建。這些食物蛋白可以很好地穩(wěn)定化納米給藥