蛋白穩(wěn)定的口服納米結(jié)晶藥物研究.pdf

1、隨著藥物篩選技術(shù)和高通量測試技術(shù)不斷發(fā)展，越來越多有價值的候選藥物被發(fā)現(xiàn)。然而，諸多候選藥物由于難溶性問題不得不被科學家們放棄。如何妥善解決藥物難溶性問題，特別是油水均難溶的問題，使更多候選藥物應(yīng)用到臨床并發(fā)揮更好的藥效，是制劑領(lǐng)域十分重要的議題。由此出發(fā)，提出了基于納米結(jié)晶制劑技術(shù)，以幾種牛奶蛋白為載體，解決藥物難溶性問題，并且適合于工業(yè)化應(yīng)用生產(chǎn)的口服納米結(jié)晶藥物的研究。研究選取伊曲康唑、somcl-9112、姜黃素等油水難溶藥物為

2、模型藥物，選用牛奶中主要蛋白酪蛋白和乳清蛋白為載體，采用高壓均質(zhì)、快速薄膜蒸發(fā)、冷凍干燥等技術(shù)，考察溫度、壓力、時間、次數(shù)、濃度等工藝參數(shù)，均得到了粒徑小（約200nm）、粒度分布均勻、工藝簡單、載藥量高、溶解度大大提升的口服納米結(jié)晶藥物體系。Somcl-9112和伊曲康唑的體外溶出和藥代動力學實驗證明該體系藥物溶出速度加快，生物利用度得到提高。具體內(nèi)容為：
　?。?）蛋白的選擇與制備。首先，初步純化了酪蛋白，使其可直接溶于水。其

3、次，對酪蛋白進行了琥珀酸苷的修飾，得到琥珀酰化的酪蛋白，通過顯色反應(yīng)經(jīng)紫外分光光度計檢測?；染_到95％以上。接著，采用等電點沉淀法簡單分離乳清蛋白為α-乳白蛋白（α-la）、β-乳球蛋白（β-lg）。選用的5種牛奶蛋白載體為：純化的酪蛋白，琥珀?；睦业鞍?，乳清蛋白（WPI95），α-la，β-lg。
　　（2）口服納米結(jié)晶藥物體系工藝研究。優(yōu)化后的工藝條件為：用氯仿和無水乙醇混合溶劑溶解藥物，用水溶解蛋白至合適濃度，高剪切混

4、合油水兩相，得到的初乳經(jīng)高壓均質(zhì)機低溫均質(zhì)，快速薄膜蒸發(fā)得到納米混懸液，最后冷凍干燥得到納米結(jié)晶載藥體系。不同蛋白和藥物工藝條件有差別。
　?。?）中試放大。采用中試設(shè)備，根據(jù)優(yōu)化后的工藝條件進行中試放大，均得到了粒徑?。s200 nm）、粒度分布均勻的產(chǎn)品，和小試幾乎無差別。
　?。?）自制口服納米結(jié)晶藥物體系表征。采用激光粒度儀（Nanosizer ZS90）測定樣品的粒徑和粒度分布（PDI）；采用紫外分光光度計（UV）

5、和高效液相色譜儀（HPLC）測定樣品載藥量和包封率，其中乳清蛋白載伊曲康唑載藥量達85.6%±0.6%，somcl-9112樣品載藥量為11.40%±0.57%，姜黃素載藥量達15.63%±2.57%，不同蛋白載藥能力不同；采用掃描電鏡（SEM），透射電鏡（TEM）來表征樣品粒子形貌，結(jié)果為球形、橢球形粒子，大小均一，粒徑和激光粒度儀測得粒徑相符；采用X-射線衍射儀（XRD）來表征結(jié)晶形態(tài)，并用差示掃描量熱儀（DSC）驗證，證明制備的納

6、米結(jié)晶載藥體系為無定形態(tài)，無定型態(tài)的樣品可能有更好的溶解行為和更高的生物利用度。由于時間有限，姜黃素口服納米結(jié)晶藥物體系完成到載藥量測定實驗，并未進行此后部分實驗。
　　（5）自制口服納米結(jié)晶藥物體系體外溶出和藥代動力學實驗。參照中國藥典2010年版進行體外溶出實驗，實驗結(jié)果顯示蛋白納米結(jié)晶載藥體系能顯著提高藥物溶解性和溶出速率。藥代動力學實驗顯示蛋白納米結(jié)晶載藥體系的生物利用度提高。純化酪蛋白、?；业鞍住⑷榍宓鞍?、α-la、β

7、-lg、α-la+10%alb載伊曲康唑組藥時曲線下面積依次分別為斯皮仁諾組的1.7倍、3倍、3.7倍、3.4倍、3.2倍和3.2倍。乳清蛋白載somcl-9112組藥時曲線下面積為somcl-9112組的2.37倍。測定任意三批次樣品，水中能溶解姜黃素的濃度分別提高到原來的291倍、378倍、402倍。
　　本研究以蛋白為口服納米結(jié)晶的穩(wěn)定劑，安全有效，其中蛋白還可以被琥珀酸酐修飾以提高其載體性能，為提高不同難溶藥物的溶解度、適