姜黃素白蛋白納米給藥系統(tǒng)的研究.pdf

1、姜黃素(curcumin，Cur)是姜科植物姜黃(Curcuma longaL.)的主要活性成分，姜黃素可抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，且抗癌譜廣，毒副作用小，是一種具有良好應(yīng)用前景的抗癌藥[1]。但姜黃素不穩(wěn)定，水溶性差，在機(jī)體內(nèi)難吸收，口服生物利用度低[2，3]，大部分以原形排出體外，臨床應(yīng)用存在諸多困難[4]。
　　近年來(lái)，納米給藥系統(tǒng)的研究取得很大進(jìn)展。納米給藥系統(tǒng)通常是由天然或合成類高分子材料制成，具有增加藥物吸收、控制藥物釋放[

2、5]，提高藥物生物利用度，降低藥物毒副作用及靶向性等特點(diǎn)[6～8]。特別是在解決水難溶性藥物方面展示了獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，為難溶性、大劑量藥物注射給藥提供了一種新的途徑[9]。但由于制備Nps的各種材料對(duì)最終制劑會(huì)產(chǎn)生較大毒性影響，需考慮載體材料的生物相容性、毒性等問(wèn)題，優(yōu)先使用低毒性、內(nèi)源性或可生物降解的生理相容性的材料，如白蛋白、明膠、聚乳酸等，其中首選白蛋白。白蛋白為內(nèi)源性物質(zhì)，具有安全無(wú)毒、無(wú)免疫原性[10]、可生物降解及生物相容性好等

3、優(yōu)點(diǎn)，是一種理想的靶向給藥系統(tǒng)載體材料[11,12]。
　　本實(shí)驗(yàn)分別采用nab技術(shù)與去溶劑化法將姜黃素制成白蛋白納米粒(Nab-Cur-BSA-Nps與Des-Cur-BSA-Nps)，并對(duì)兩者的體外釋藥特性與體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)特征進(jìn)行了初步考察。
　　第一部分Nab技術(shù)姜黃素白蛋白納米給藥系統(tǒng)的研究
　　1.建立Cur的UV含量測(cè)定方法，用紫外分光光度法建立了Nab-Cur-BSA-Nps包封率的測(cè)定方法，姜黃素在0.

4、5～6.0 mg·L-1范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系，其回歸方程為A=0.1721 C+0.0075(r=0.9999)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，采用紫外分光光度法測(cè)定Nab-Cur-BSA-Nps中Cur的含量，輔料不干擾制劑中Cur的測(cè)定，專屬性強(qiáng)，方法簡(jiǎn)便、靈敏、可行。
　　2.通過(guò)單因素考察油水比例，BSA濃度，Cur投藥量對(duì)Nab-Cur-BSA-Nps包封率的影響，篩選出最優(yōu)處方，制得Nab-Cur-BSA-Nps的優(yōu)化工藝:油水比例為

5、1∶4，BSA的濃度為1％，Cur投藥量為2.5mg。采用切割顯微鏡觀察Nab-Cur-BSA-Nps的外觀形態(tài)，激光粒徑分析儀測(cè)量納米粒粒徑。凍于制備的Nab-Cur-BSA-Nps凍干粉為外觀飽滿、無(wú)塌陷的疏松多孔狀固體，復(fù)溶后呈橘黃色有乳光的膠態(tài)溶液;凍干前的平均粒徑為245.2nm，姜黃素白蛋白納米混懸劑凍干粉復(fù)溶后平均粒徑為240.3nm，姜黃素白蛋白納米混懸劑形態(tài)圓整，粒徑分布均勻，平均包封率為（42.39±0.91）％(n

6、=3)。
　　3.以Cur原料藥為參比，采用透析袋擴(kuò)散法考察Nab-Cur-BSA-Nps的體外釋藥行為，72h體外累計(jì)釋藥率為96％。建立了HPLC法測(cè)定大鼠血漿中、小鼠各組織中Cur的含量的方法學(xué);以自制的姜黃素溶液(Cur-Sol)為對(duì)照，對(duì)Nab-Cur-BSA-Nps進(jìn)行了體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)和組織分布動(dòng)力學(xué)的研究。
　　本課題成功制備了Nab-Cur-BSA-Nps，制備方法簡(jiǎn)便，重現(xiàn)性好，避免了大量表面活性劑的使用，明顯

7、提高了藥物在肺、肝中的濃度，有望成為姜黃素的新型納米給藥系統(tǒng)制劑。
　　第二部分去溶劑化法姜黃素白蛋白納米給藥系統(tǒng)的研究
　　1.建立用紫外分光光度法測(cè)定Des-Cur-BSA-Nps包封率的測(cè)定方法，姜黃素在0.5～6.0 mg·L-1范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系，其回歸方程為A=0.1721C+0.0075(r=0.9999)。
　　2.通過(guò)單因素考察BSA濃度，Cur投藥量，戊二醛用量對(duì)Des-Cur-BSA-Nps包封

8、率、粒徑的影響，篩選出最佳工藝，制得Des-Cur-BSA-Nps的優(yōu)化工藝:BSA的濃度為1％，Cur投藥量為4mg，戊二醛用量為0.5％×50μL。按優(yōu)化工藝制備所得Des-Cur-BSA-Nps平均包封率為（92.60±0.38）％(n=3)。采用激光粒徑分析儀測(cè)定粒徑，平均粒徑316.6nm。加入蔗糖為凍干保護(hù)劑的姜黃素白蛋白納米粒凍干粉為外觀飽滿、無(wú)塌陷的疏松多孔狀固體，復(fù)溶后呈橘黃色有乳光的膠態(tài)溶液，粒徑為314.6nm。<

9、br>　　3.以Cur原料藥為參比，采用透析袋擴(kuò)散法考察Des-Cur-BSA-Nps的體外釋藥行為，24h體外累計(jì)釋藥率達(dá)85％。采用HPLC法測(cè)定大鼠血漿中姜黃素的含量，并建立其方法學(xué);以自制的姜黃素溶液（Cur-sol）為對(duì)照，以大鼠為研究對(duì)象，對(duì)Des-Cur-BSA-Nps進(jìn)行了體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)的研究。
　　本課題采用去溶劑化法制備的Des-Cur-BSA-NPs大大提高了Cur在水相中藥物濃度。其粒徑小，穩(wěn)定性高，該制備