梗阻性腎病中腎小管周圍毛細(xì)血管損傷和依那普利保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、該課題通過建立大鼠單側(cè)輸尿管完全梗阻(complete unilateral ureteral obstruction,CUUO)模型,來觀察PTC的密度、形態(tài)學(xué)變化以及血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白的表達(dá)水平,分析其相關(guān)性以及與腎小管上皮細(xì)胞凋亡和間質(zhì)纖維化之間的關(guān)系;進(jìn)一步應(yīng)用依那普利進(jìn)行干預(yù)治療,觀察其對(duì)PTC和腎小管的保護(hù)作用.方法:選用42只剛斷乳雄性

2、Sprague-Dawley(SD)大鼠進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn).在氯氨酮麻醉下,36只大鼠用4-0絲線雙重結(jié)扎左側(cè)腎盂輸尿管連接部,制成單側(cè)輸尿管完全梗阻(CUUO)模型.術(shù)后0、1、7、14、28天,分別隨機(jī)選擇6只CUUO模型大鼠,麻醉下收藏腎臟標(biāo)本后,采取斷髓法處死.治療組隨機(jī)選6只CUUO模型大鼠,麻醉下收獲腎臟標(biāo)本后,采取斷髓法處死.治療組隨機(jī)選6只CUUO模型大鼠,從第五天開始在其飲用水中加入依那普利(200mg/L),直至第14天收

3、集腎臟標(biāo)本.假手術(shù)(SO)組6只大鼠僅剖腹暴露輸尿管后不作結(jié)扎,術(shù)后第14天收集腎臟標(biāo)本.所有腎臟標(biāo)本常規(guī)病理切片,分別用HE、PAS和Masson染色觀察組織學(xué)變化.用電鏡技術(shù)研究腎小管上皮細(xì)胞和PTC的形態(tài)學(xué)變化,用Flk-1標(biāo)記PTC后進(jìn)行密度測定.用TUNEL方法檢測原位細(xì)胞凋亡,免疫組織化學(xué)方法檢測VEGF蛋白表達(dá)水平.用Leica圖像分析系統(tǒng)對(duì)VEGF蛋白的表達(dá)強(qiáng)度和間質(zhì)纖維化程度進(jìn)行半定量檢測.結(jié)論:大鼠的CUUO模型中,