放射性受體分析法快速篩檢動物組織中β-內酰胺類獸藥殘留.pdf

1、目前β-內酰胺類抗生素是最為廣泛使用的一類抗生素，同時β-內酰胺類是牛奶和組織中檢出殘留報道最多的約物。長期以米，傳統(tǒng)的β-內酰胺類獸藥殘留的初篩檢測多以杯碟法為主。但由于具備抑菌作用的抗生素種類繁多，且干擾因素較多。杯碟法檢測剛性后難以確定抗生素具體種類，容易出現(xiàn)誤判，假陽性率較高。而放射性受體分析法是一種對微生物受體進行標記，其原理是將放射免疫測定(RIA)、酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)、生物發(fā)光技術和化學發(fā)光技術相結合進行檢測的

2、新型檢測技術。本文就放射性受體分析法檢測β-內酰胺類獸藥殘留的實驗方案進行了設計，并對各類參數(shù)進行了驗證。主要做了以下工作： 1．制定了完整、成熟、有效的放射性受體分析法快速篩檢動物組織中β-內酰腋類獸約殘留檢測方案，并對實驗過程可能山現(xiàn)的影響因素進行了討論。 2．對包括提取液的選擇、pH的影響、孵育時間在內等影響檢測的實驗條件進行選擇與確定，最終選擇pH 7.0的MSU 萃取緩沖溶液作為提取液，并將溫浴時間確定為2mi

3、n。 3．對檢測的選擇性利特異性進行驗證。分別選擇了青霉素G鉀、阿莫西林、氨芐西林、鄰氯青霉素、雙氯青霉素、頭孢噻呋進行交叉反應試驗，實驗結果表明該測定方法對各β-內酰胺類藥物具有良好的選擇性；用MSU緩沖溶液配制1000 μg/kg的恩諾沙星、新霉素、慶人霉素、鏈霉素、螺旋霉素、林可霉素、四環(huán)霉素、氯霉素、磺胺二甲基嘧啶、紅霉素的混合標準溶液對檢測方案的特異性進行驗證，6次檢驗結果cpm均明顯高于表3中β-內酰胺類藥物的cpm

4、值，結果確定為陰性，實驗結果表明該方法對β-內酰胺類藥物有良好的特異性。 4．對檢測方案的檢測限進行了研究。靈敏度實驗結果表明，當藥物濃度增加到20βg/kg后，如果將藥物濃度繼續(xù)增人也無法對測定的cpm值產生明顯的改變；確定及驗證不同基質中檢測限的結果表明，各種基質中In(p)均與cpm值存在著良好的線性關系，豬肉、牛肉、雞肉、魚肉及蝦肉等基質的檢測控制點分別為930、865、955、994和890。 5．對檢測的影響