TfR介導(dǎo)的肝癌靶向性雙基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng)的構(gòu)建及體外效應(yīng)研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：利用肝癌細胞表面高表達轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(transferrin receptor，TfR)的特點，構(gòu)建轉(zhuǎn)鐵蛋白受體介導(dǎo)的Survivin反義RNA/HSP70雙基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng)并觀察其對人肝癌細胞的靶向殺傷效應(yīng)。 方法：用EDC法制備轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體(即CD71抗體)與多聚左旋賴氨酸(PLL)的復(fù)合物，將攜帶有外源基因的質(zhì)粒DNA與轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體結(jié)合在一起，形成一種可溶性的蛋白-核酸復(fù)合物。根據(jù)DNA阻滯實驗的結(jié)果，重組質(zhì)粒與A

2、b-PLL復(fù)合物按1：1混合，得到Ab-PLL-DNA雙基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng)，將此復(fù)合物通過體外轉(zhuǎn)染人肝癌HepG2細胞觀察其對肝癌細胞的靶向殺傷效應(yīng)。 結(jié)果：成功制備了Ab-PLI-pIRES2-DsRed2 Survivin反義RNA/HSP70雙基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng)，并通過TfR的內(nèi)吞作用將外源基因?qū)敫伟┘毎⒌靡员磉_。轉(zhuǎn)染復(fù)合物組HepG2細胞的增殖抑制、凋亡指數(shù)增加、熱休克蛋白70表達增強。 結(jié)論：Ab-PLL-DNA雙基因

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