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文檔簡介
1、近年來N-乙酰天冬氨酰谷氨酸(NAAG)在神經(jīng)保護方面的作用逐漸得到關注。本實驗中應用Ellis細胞牽張損傷模型體外模擬臨床輕度腦外傷,分別觀察NAAG 在NAAG 肽酶不同活性狀態(tài)下對神經(jīng)細胞保護作用的變化,為探索新的腦外傷保護策略提供實驗依據(jù)。 第一部分、大鼠海馬膠質(zhì)細胞培養(yǎng)牽張損傷模型的建立 目的:建立大鼠海馬膠質(zhì)細胞培養(yǎng)牽張損傷模型。 方法:TBI組采用CIC Ⅱ型細胞損傷裝置,根據(jù)Ellis方法建立大鼠
2、海馬星形膠質(zhì)細胞體外牽張損傷模型,損傷程度分輕、中、重三級。Sham TBI組不予損傷,其余操作同TBI組。分別在2h和24h檢測細胞乳酸脫氫酶釋放量,并通過碘化丙啶熒光染色觀察細胞損傷情況。 結(jié)果:細胞培液中乳酸脫氫酶釋放量隨著損傷程度加重而增高。 結(jié)論:Ellis細胞牽張損傷模型使用方便,可重復性好,適于進行神經(jīng)細胞機械性體外損傷的研究。 第二部分 NAAG對體外培養(yǎng)大鼠海馬膠質(zhì)細胞牽張損傷的神經(jīng)保護效應研究
3、 目的:研究NAAG對大鼠海馬膠質(zhì)細胞體外牽張損傷的保護效應。 方法:建立大鼠海馬星形膠質(zhì)細胞體外輕度牽張損傷模型。NAAG肽酶活性存在組牽張損傷后加入不同濃度NAAG,NAAG肽酶活性抑制組以磷酸鹽抑制NAAG肽酶活性,牽張損傷后加入不同濃度NAAG。并分別設立對照組。 結(jié)果:加入NAAG后NAAG肽酶活性存在組細胞損傷程度加重,活性抑制組細胞損傷程度減輕。 結(jié)論:NAAG在NAAG肽酶活性被抑制情況下
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