大鼠室下區(qū)神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的建立及BME對(duì)其自然分化的影響.pdf

1、該實(shí)驗(yàn)利用倒置顯微鏡、熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀等實(shí)驗(yàn)儀器,采用免疫熒光法、免疫細(xì)胞化學(xué)方法、流式細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)、MTT比色檢測(cè)技術(shù),并借助二巰基乙醇(β-mercaptal ethanol,BME)作為誘導(dǎo)干預(yù)因素,從胚胎大鼠腦室下區(qū)分離培養(yǎng)、鑒定神經(jīng)干細(xì)胞,并觀察其向神經(jīng)元的自然分化及BME誘導(dǎo)分化情況,試圖為闡明神經(jīng)干細(xì)胞的分化機(jī)制提供一條新的思路.該次實(shí)驗(yàn)結(jié)論:(1)所得到的細(xì)胞克隆經(jīng)mestin免疫熒光染色及分化后細(xì)胞的NSE、GF

2、AP、GalC免疫細(xì)胞化學(xué)染色,鑒定為神經(jīng)干細(xì)胞,可認(rèn)為在該實(shí)驗(yàn)室建立了大鼠神經(jīng)干細(xì)胞體外培養(yǎng)模型.(2)10μM BME處理組、100μM BME處理組與對(duì)照組相比對(duì)細(xì)胞活性無(wú)明顯影響,而500μM BME處理組則較對(duì)照組細(xì)胞活性顯著下降(P<0.05),1mM BME處理組和5mM BME處理組基本上神經(jīng)干細(xì)胞不能存活.(3)神經(jīng)干細(xì)胞在自然分化條件與100μM BME誘導(dǎo)條件下分化8d后神經(jīng)元所占比例分別為31.6﹪和32.3﹪,