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文檔簡介
1、目的:
本實驗通過構(gòu)建apoE-KO小鼠動脈粥樣硬化模型,探討miR-206對apoE-KO動脈粥樣硬化小鼠肝臟膽固醇逆轉(zhuǎn)運相關(guān)蛋白肝臟X受體α表達和膽固醇流出率的影響,進一步研究miR-206參與膽固醇逆轉(zhuǎn)運的機制。
方法:
高脂飲食喂養(yǎng)apoE-KO小鼠30只,建立動脈粥樣硬化模型。將小鼠隨機平均分為3組,A組:PBS對照組;B組:miR-206 mimic組;C組:miR-206 inhibitor組
2、。分別于腹腔皮下注射PBS溶液、miR-206 mimic溶液、miR-206 inhibitor溶液。4周后,眶靜脈取血檢測血脂水平,取主動脈根部HE染色及油紅O染色觀察動脈粥樣硬化程度,熒光定量RT-PCR和Western-blot法檢測各組小鼠肝臟mRNA相對表達量和蛋白含量,液態(tài)閃爍計數(shù)法檢測各組小鼠腹腔巨噬細胞膽固醇的流出率。
結(jié)果:
miR-206 mimic組較對照組HDL-C水平升高;與對照組、miR
3、-206 mimic組相比,miR-206 inhibitor組TC、LDL均顯著升高,HDL明顯下降。各組TG無明顯不同。主動脈根部行HE染色、油紅O染色可見對照組粥樣硬化程度較輕,miR-206 inhibitor組動脈粥樣硬化程度最為嚴重,miR-206 mimic組動脈粥樣硬化病變極其微小。與對照組相比,miR-206 mimic組肝LXRαmRNA和蛋白表達增多,miR-206 inhibitor組表達減少。膽固醇流出率的結(jié)果
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