維生素D受體基因多態(tài)性和乙型肝炎病毒與胰腺癌的相關研究.pdf

1、研究背景：
　　隨著醫(yī)療技術的進步，部分惡性腫瘤的治療和預后得到了極大改善，但是胰腺癌的治療和預后仍然處于另一種相對不同的情況。根據最新統(tǒng)計數據，世界范圍內胰腺癌死亡率在總癌癥死亡率中占第8位，發(fā)達國家中占總癌癥死亡率的第4位，每年約有266000人死于胰腺癌，并且大部分病人在確診后的一年內死亡。胰腺位于腹膜后間隙造成胰腺癌早期癥狀隱匿，直到患者出現明顯癥狀而確診時疾病多已處于進展期。胰腺癌的預后很大程度上與腫瘤分期有關，早期病人

2、術后5年生存率已經達到20％左右，但是總體的5年生存率仍然不足5％。因此針對胰腺癌危險因素的一級預防在整個疾病的防治中尤為重要。
　　目前認為導致個體罹患胰腺癌的因素大體分為兩類:一種是基因因素。關于基因多態(tài)性與胰腺癌的關系，人們做了相當深入的研究，也發(fā)現了某些基因多態(tài)性與胰腺癌的發(fā)病風險存在相關性。既往研究顯示維生素D(Vitamin D,VD)在體外實驗中可以明顯抑制胰腺癌細胞的增殖以及口服補充VD的劑量或接受日光照射時間長短

3、與胰腺癌的發(fā)病風險相關。但是關于維生素D受體(Vitamin D receptor,VDR)基因多態(tài)性與胰腺癌的關系的研究仍非常有限。
　　另一種是環(huán)境及后天生理病理因素，如吸煙、飲酒、肥胖、糖尿病以及慢性胰腺炎等。近5年來關于乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus，HBV）與胰腺癌相關性的研究逐漸成為胰腺癌流行病學的一個熱點，但是不同研究的結果存在爭議。我們在進行病例對照研究的基礎上匯總既往文獻報道結果更新meta分析

4、結果以進一步探討兩者之間的關系。
　　本課題以濟南為中心的山東地區(qū)胰腺癌病人和健康人群為研究對象，采用適宜的試驗方法，對VDR基因rs2228570、rs1544410位點多態(tài)性和HBV與胰腺癌發(fā)病風險的相關性進行了研究，同時分別探討VDR基因多態(tài)性和HBV與胰腺癌發(fā)生部位、疾病分期和病理分化程度的相關性。
　　第一部分維生素D受體基因rs2228570、rs1544410多態(tài)性與胰腺癌的相關研究
　　VDR作為一種親

5、核蛋白受體，廣泛分布于體內各組織細胞中。早期研究發(fā)現VDR在體內的生物學作用主要是經典的鈣磷平衡調節(jié)作用，隨著近年來研究的不斷深入，相關結果顯示VDR還具有調節(jié)細胞周期、抑制細胞增殖及促進細胞分化和凋亡的作用?；谝陨涎芯浚琕DR的表達以及VDR基因多態(tài)性與癌癥的研究成為近十年來的研究熱點之一。目前的研究結果顯示VDR表達與人類癌細胞株的分化程度有關，對多種組織來源的癌細胞如人前列腺癌細胞、乳腺癌細胞、皮膚癌細胞以及胰腺癌細胞具有調節(jié)生

6、長、分化的作用，同時對抑制癌細胞等方面有調節(jié)作用。為了進一步探討VDR基因多態(tài)性與胰腺癌的關系，我們設計了本部分研究來分析VDR基因多態(tài)性與胰腺癌的發(fā)病風險、腫瘤發(fā)生部位、疾病分期和癌細胞分化的關系。
　　目的與方法：
　　本研究中探討VDR基因rs2228570、rs1544410位點多態(tài)性與胰腺癌的關系。病例組為經病理確診為胰腺腺癌的患者，對照組為健康查體人群，病例組共258人、對照組385人，病例組與對照組為1∶1.5

7、。我們應用限制性片段長度多態(tài)性聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism，PCR-RFLP)技術測定VDR基因rs2228570、rs1544410多態(tài)性等位基因以及基因型的頻數，并進行單因素以及多因素邏輯回歸分析來研究不同等位基因、基因型與胰腺癌發(fā)病風險的關系;此外，通過應用列聯表分析來檢驗基因型頻率與胰腺癌發(fā)生部位、疾病分

8、期和腫瘤分化程度的關系。
　　結果：
　　1.rs2228570單核苷酸位點與胰腺癌的關系
　　分別進行單因素回歸分析和調整年齡、性別、吸煙史、飲酒史及糖尿病等混雜因素的多因素回歸分析，結果顯示:rs2228570基因多態(tài)性中TT基因型與胰腺癌發(fā)病風險顯著相關（單因素:OR=3.024，95％CI=1.919～4.764，P=0.005;多因素:AOR=2.978，95％CI=1.844～4.81，P=0.0006）;

9、攜帶至少一個T等位基因的CT+TT基因型胰腺癌患病風險顯著增加（單因素:OR=2.424,95％CI=1.718～3.420,P=0.001;多因素:AOR=1.995,95％CI=1.311～3.035，P=0.0013）;T等位基因與胰腺癌發(fā)病風險顯著相關(OR=1.869，95％CI=1.489～2.347，P=0.0001)。將胰腺癌按高分化、中分化、低分化分組，將胰腺癌分化程度與rs2228570多態(tài)性基因型頻率進行列聯表分析

10、，結果顯示rs2228570基因多態(tài)性與胰腺癌分化程度顯著相關(P=0.006,x2=19.7208)。
　　2.rs1544410基因多態(tài)性與胰腺癌的關系
　　分別進行單因素回歸分析和調整年齡、性別、吸煙史、飲酒史及糖尿病等混雜因素的多因素回歸分析，結果顯示:至少含有一個G等位基因的AG+GG基因型與胰腺癌患病風險呈負相關（單因素:OR=0.631，95％CI=0.449～0.887,P=0.008;多因素:AOR=0.6

11、48,95％CI=0.453～0.928,P=0.0179）;G等位基因與胰腺癌發(fā)病風險呈負相關且有明顯統(tǒng)計學意義(OR=0.756，95％CI=0.603～0.947，P=0.015);單獨分析AG、GG基因型，未見明顯相關性。胰腺癌按TNM分期分為Ⅰ～Ⅳ期，將胰腺癌分期與rsi544410多態(tài)性基因型頻率進行列聯表分析，結果顯示rs1544410基因多態(tài)性與胰腺癌分期相關性有明顯統(tǒng)計學意義(P=0.0148，x2=15.8179)。

12、
　　結論：
　　1.VDR基因多態(tài)性與個體罹患胰腺癌的風險之間存在顯著相關性。rs2228570位點突變純合子可以導致胰腺癌發(fā)病風險增加，突變位點T以及攜帶至少一個T位點的基因型與胰腺癌發(fā)病風險增加有關;rs1544410突變基因位點G則可以降低胰腺癌的發(fā)病風險。
　　2.VDR基因多態(tài)性與胰腺癌的病理分化、疾病分期等臨床特征相關，從而可能影響疾病的預后。
　　第二部分乙型肝炎病毒與胰腺癌相關性的研究以及更新m

13、eta分析
　　慢性HBV感染是指感染HBV超過6個月，機體未徹底清除病毒的感染狀態(tài)。慢性HBV感染可以有明確的急性乙肝病史，也可能由于嬰幼兒時期感染HBV，由于當時免疫系統(tǒng)尚未健全無法清除病毒而導致病毒潛伏于機體。近年來關于隱匿性HBV攜帶狀態(tài)的研究逐漸增多，臨床多以乙肝表面抗原陰性而乙肝核心抗體陽性為特點。我國慢性HBV流行率約為7％，相比較全球感染情況，我國所面臨由HBV引起的公共衛(wèi)生威脅更加嚴重。近年來的研究表明HBV除定

14、植于肝組織中外，也可以定植于肝外組織比如腎臟、皮膚和胰腺組織中，既往已有數個隊列研究和病例對照研究探討HBV是否可能增加胰腺癌的發(fā)病風險，但不同研究所得的結果存在爭議。本部分研究中包括胰腺癌病人與健康對照組的病例對照研究;結合病例對照研究結果并匯總以前發(fā)表的關于HBV與胰腺癌的研究結果進行的meta分析更新，以進一步探討HBV與胰腺癌的關系。
　　目的與方法：
　　病例對照研究中，病例組為收集的胰腺腺癌病人，對照組為健康查體

15、人群。病例組258人、對照組385人，病例組與對照組為1∶1.5。課題中收集了病例組和對照組人群的HBV攜帶狀態(tài)、年齡、性別、吸煙史、飲酒史以及糖尿病等臨床特征，進行單因素以及多因素邏輯回歸分析來研究HBV與胰腺癌發(fā)病風險的關系;并結合以上分析結果同時匯總2013年6月以前關于HBV與胰腺癌的研究結果更新meta分析以進一步檢驗兩者之間的相關性;此外，通過應用列聯表分析來檢驗HBV與胰腺癌發(fā)生部位、分期和分化程度的關系。
　　結果

16、：
　　1.HBV與胰腺癌發(fā)病風險的分析
　　回歸分析結果顯示:乙肝表面抗原陽性組胰腺癌發(fā)病風險顯著增加（單因素:OR=2.380，95％CI=1.556～3.606，P=0.001;多因素:AOR=3.339，95％CI=2.081～5.358，P=0.001），根據HBV血清學標志物分層研究結果顯不HBsAg+/antiHBcAb+組與胰腺癌發(fā)病風險顯著相關（單因素:OR=3.375，95％CI=1.915～5.950,

17、P=0.001;多因素:AOR=3.864,95％CI=2.057～7.255P=0.0032）;多因素分析顯示隱匿性HBV攜帶組（HBsAg-/antiHBcAb+組）胰腺癌發(fā)病風險明顯增加（AOR=1.163，95％CI=0.774～1.747，P=0.031）。meta分析結果顯示HBV可以顯著增加胰腺癌發(fā)病風險(OR=1.392，95％CI=1.167～1.660，P=0.00)，亞組分析時隊列研究meta亞組分析結果處于臨界統(tǒng)

18、計學意義（OR=1.307，95％CI=0.966～1.715，P=0.053）。
　　2.HBV與胰腺癌部位、分期以及分化程度的關系
　　將胰腺癌按高分化、中分化、低分化分組，將胰腺癌分化程度與HBV相關各組進行列聯表分析，結果顯示HBV與胰腺癌分化程度顯著相關(P=0.001，x2=37.4118)
　　結論：
　　1.研究結果提示慢性HBV感染可顯著增加胰腺癌的發(fā)病風險，隱匿性HBV攜帶與胰腺癌的發(fā)病風險明