載脂蛋白E基因多態(tài)性與乙型肝炎病毒感染的相關(guān)性研究.pdf

1、乙型肝炎病毒(HBV)感染是引起人類(lèi)肝臟疾病的主要原因。在中國(guó)，慢性乙型肝炎居感染性疾病首位，發(fā)病率和死亡率很高，HBV感染后臨床預(yù)后不同，主要取決于個(gè)體免疫能力，而決定宿主不同免疫能力的遺傳因素是個(gè)體基因的多態(tài)性。近年來(lái)研究顯示，ApoE基因多態(tài)性與多種感染性疾病如瘧疾、單純皰疹病毒、丙型肝炎病毒(HCV)、人類(lèi)獲得性免疫缺陷病毒(HIV)感染的臨床后果密切相關(guān)，而其與HBV感染的關(guān)系卻少有報(bào)道。因此，有必要系統(tǒng)地研究ApoE基因多態(tài)

2、性與HBV感染的關(guān)系，分析乙型肝炎發(fā)生的遺傳風(fēng)險(xiǎn)因素，闡明ApoE基因多態(tài)性在HBV感染中的作用，為HBV感染的預(yù)防、治療和預(yù)后提供臨床參考。
　　 目的：比較不同血清學(xué)標(biāo)志物的HBV感染者與健康體檢者ApoE的基因多態(tài)性，分析ApoE基因多態(tài)性與HBV感染的關(guān)系。
　　 方法：
　　 1、研究組為194例慢性HBV感染者，根據(jù)感染情況分為A組(俗稱“小三陽(yáng)”組)、B組(俗稱“大三陽(yáng)”組)，對(duì)照組為107例健康體

3、檢者。采集其空腹靜脈血，用化學(xué)發(fā)光微粒子免疫檢測(cè)法檢測(cè)HBV血清學(xué)標(biāo)志物，全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)肝功能和血脂水平。肝功能指標(biāo)包括ALT、AST、r-GT、TBIL、DBIL、TP、ALB和TBA，血脂指標(biāo)包括TCH和TG。
　　 2、采集空腹靜脈血，EDTA-K2抗凝處理，提取其基因組DNA，采用多重特異性擴(kuò)增突變系統(tǒng)(theMultiplexAmplificationRefractoryMutationSystem，multi－

4、ARMS)擴(kuò)增ApoE基因片段，用DNA測(cè)序儀進(jìn)行毛細(xì)管電泳后判定ApoE等位基因和基因型，用基因測(cè)序來(lái)驗(yàn)證其正確性。
　　 3、應(yīng)用SPSS15.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。ApoE等位基因和基因型頻率分布采用直接計(jì)數(shù)法，生化指標(biāo)值組間差異采用方差分析；分類(lèi)變量資料比較用x2檢驗(yàn)。Hardy-Weinberg平衡采用Pearson卡方檢驗(yàn)；二分類(lèi)非條件Logistic回歸模型校正混雜因素的影響，計(jì)算校正OR值及95％CI。所有檢驗(yàn)方

5、法均采用雙側(cè)檢驗(yàn)，p≤0.05時(shí)認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1、研究組(A組、B組)生化指標(biāo)ALT、AST、r-GT、TBIL、DBIL、TP、TBA的均值高于對(duì)照組，ALB均值低于對(duì)照組，且研究組部分病例的ALT、AST、r－GT、TBIL、DBIL、TBA值超過(guò)本實(shí)驗(yàn)室的生物參考區(qū)間上限，B組中極少部分被試(8例)ALB略低于本實(shí)驗(yàn)室的生物參考區(qū)間下限。將其中呈偏態(tài)分布的數(shù)據(jù)經(jīng)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換成正態(tài)分布后發(fā)現(xiàn)

6、，與對(duì)照組相比，A組和B組的ALT、AST、DBIL，B組的TBA值組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)，余各組生化指標(biāo)值在本實(shí)驗(yàn)室的生物參考區(qū)間內(nèi)，組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。
　　 2、不同HBV感染模式組與對(duì)照組ApoE基因型和等位基因頻率分布經(jīng)x2檢驗(yàn)，ApoE基因型頻率實(shí)測(cè)值與理論值之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)，各組基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡，具有群體代表性。
　　 3、

7、研究組(A組、B組)和對(duì)照組的ApoE3個(gè)等位基因(ε2、ε3、ε4)和6種基因型(ε2/2、ε3/3、ε4/4、ε2/3、ε2/4、ε3/4)頻率分布中，ε3和ε3/3頻率最高，分別為87.3％－91.6％和74.5％－84.1％，未檢出ε2/2、ε4/4基因型。對(duì)照組、A組、B組間ApoE基因型和等位基因總體率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.003和p=0.005)。研究組ε2/3基因型頻率高于對(duì)照組(9.3％vs.1.9％，p=0.0

8、14)，研究組ε2等位基因頻率高于對(duì)照組(4.9％vs.1.4％，p=0.039)。
　　 4、分別將各組單一ApoE基因型頻率與余基因型之和頻率相比，A組ε2/3基因型頻率明顯高于對(duì)照組和B組(14.6％vs.1.9％，OR=8.936，95％CI：2.002-39.893，x2=11.458，p＜0.0125；14.6％vs.2.4％，OR=6.979，95％CI：1.558-31.261，x2=8.373，p＜0.0125

9、)，A組ε2等位基因頻率亦明顯高于對(duì)照組和B組(7.3％vs.1.4％，OR=5.516，95％CI：1.584-19.216，x2=8.93，p＜0.0125；7.3％vs.1.8％，OR=4.314，95％CI：1.236-15.058，x2=6.158，p＞0.0125)。其余基因型及等位基因頻率組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。為剔除性別、年齡、飲酒、BMI等混雜因素的影響，引入了二分類(lèi)非條件Logistic回歸模型，結(jié)果顯示，ε2等位基因

10、的校正OR值為5.648(OR=5.648，95％CI：1.267－25.171，p=0.023)；ε2/3基因型(A組vs.對(duì)照組)的校正OR值為8.641(OR=8.641，95％CI：1.925-38.797，p=0.005)。
　　 結(jié)論：
　　 1、在中國(guó)北方漢族人口中，HBV感染者ApoE等位基因及基因型頻率分布中，ε2等位基因頻率明顯高于正常健康人群，ApoEε2等位基因?yàn)镠BV感染的遺傳風(fēng)險(xiǎn)因素。