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文檔簡介
1、目的:探討1,25(OH)2D3對系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者 T淋巴細(xì)胞亞群的免疫調(diào)節(jié)作用。
方法:1.所有人均為我院風(fēng)濕免疫科2013年4月到2013年11月的門診和住院患者;實驗組來自我院住院確診SLE患者共24例,診斷依據(jù)1997年美國風(fēng)濕病學(xué)會(ACR)修訂的S LE分類診斷標(biāo)準(zhǔn);疾病對照組來自我院確診類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)患者共12例,RA組均符合2009年ACR和歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟(EULAR)分類標(biāo)準(zhǔn);健康對照組1
2、3例;根據(jù)SLE疾病活動性指數(shù)(SLEDAI)評分SLEDAl≥10分表示疾病活動。2.采用密度梯度離心法分離三組外周血單個核細(xì)胞(PBMC),采用磁珠正選法分離T淋巴細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)鑒定T淋巴細(xì)胞純度大于96%,以1×109/L種植于24孔板(1.0ml/孔)。(1)分別在實驗組、疾病對照組和健康對照組的 RMPI-1640體系中加入1,25(OH)2D3,同時設(shè)立空白對照組,孵育48小時后,bioplex法檢測上清液中IL-1β、T
3、NF-α、IFN-γ、IL-4、IL-23水平。(2)RPMI-1640體系中加入佛波酯(PMA)/離子霉素(Ionomycin)以建立 Th17細(xì)胞培養(yǎng)體系,加入1,25(OH)2D3,并設(shè)立空白對照組,48小時后檢測上清液中IL-17水平。
結(jié)果:(1)SLE患者T淋巴細(xì)胞經(jīng)維生素D3體外干預(yù)48小時后的細(xì)胞上清液IL-4明顯高于自身對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),IL-23、IFN-γ、IL-17水平顯著低于自
4、身對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),TNF-α水平低于自身對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。(2)RA患者T淋巴細(xì)胞經(jīng)維生素D3干預(yù)后的細(xì)胞上清液IL-4明顯高于自身對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),IL-23、IFN-γ、TNF-α、IL-17、IL-1β水平顯著低于自身對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。(3)在活性維生素D3干預(yù)下,SLE患者外周血T淋巴細(xì)胞分泌的IL-4水平高于健康對照組,差異有統(tǒng)計
5、學(xué)意義(P<0.01),分泌的IFN-γ、TNF-α、IL-23水平高于健康對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),IL-17水平高于健康組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。(4)在活性維生素D3干預(yù)下,RA患者外周血T淋巴細(xì)胞分泌的IL-4水平明顯高于健康對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),分泌的IL-23水平明顯高于健康對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),TNF-α、IL-17水平高于健康組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0
6、.05)。(5)活性維生素D3干預(yù)后,SLE組干預(yù)后與干預(yù)前的IL-4差值明顯高于RA組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01).
結(jié)論:1、活性維生素D3抑制SLE患者外周血Th1(IFN-γ)和Th17(IL-17)相關(guān)細(xì)胞因子的表達,促進Th2相關(guān)細(xì)胞因子(IL-4)的表達,推斷活性維生素D3可能對SLE患者T淋巴細(xì)胞亞群有免疫調(diào)節(jié)作用,對Th1/Th2/Th17細(xì)胞調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)平衡有調(diào)控作用。2、活性維生素D3對SLE患者外周血
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