系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者調(diào)節(jié)性T細胞亞群和自身抗體聚類分析.pdf

1、目的：系統(tǒng)紅斑狼瘡患者自身耐受機制的缺陷，引起自身反應性T和B細胞過度活躍，產(chǎn)生多種無器官特異性的針對自身細胞核成分的自身抗體，導致疾病的發(fā)生、發(fā)展。以CD4+CD25+Foxp3+標記的調(diào)節(jié)性T細胞(簡稱Treg)具有免疫抑制活性，在外周免疫耐受中發(fā)揮著重要作用，其根據(jù)CD45RA、CD62L、CCR7可以分為初始型Treg亞群和記憶型Treg亞群。理論上推測Treg數(shù)目減少和(或)功能下降與SLE發(fā)病，特別是病情活動有關(guān)，但實際上，

2、多個臨床研究的結(jié)果不盡一致，可能與不同研究者采用不同的標志物標記的Treg有關(guān)，也可能與SLE患者使用糖皮質(zhì)激素和細胞毒藥物等對Treg的影響有關(guān)。SLE的免疫紊亂多樣化，導致患者自身抗體譜和臨床表現(xiàn)的多樣化，而且兩者間存在一定的關(guān)聯(lián)，如抗dsDNA與腎損害，抗SSA與光敏感，抗RNP與雷諾現(xiàn)象。此外，SLE患者的預后不一，自身抗體聚類分析有助于鑒別出不同的臨床亞型，因而可以對器官損傷、病程、預后做出預測。然而，目前尚缺乏對中國南方SL

3、E病人的大樣本調(diào)查結(jié)果。
　　 本研究旨在了解我國南方SLE患者自身抗體與臨床表現(xiàn)相關(guān)性及自身抗體亞型的特點，同時探討由CD4+CD25+FoxP3+標記的Treg(簡稱Treg-FoxP3)和CD4+CD25+CD127low/-標記的Treg(簡稱Treg-CD127low/-)及CD45RA、CD62L、CCR7、CTLA-4標記兩者的亞群在SLE發(fā)病機制中的作用。
　　 方法：對917例系統(tǒng)性紅斑狼瘡住院患者進行

4、回顧性研究，同時流式細胞儀檢測45例SLE患者和45例健康自愿者外周血CD4+T細胞中CD4+CD25+FoxP3+Treg及其亞群所占的百分比。
　　 結(jié)果：
　　 ⑴自身抗體與臨床表現(xiàn)：抗dsDNA抗體與腎損害、白細胞減少、貧血呈顯著正相關(guān)；抗Sm抗體與面頰紅斑/盤狀紅斑、心包炎、白細胞減少呈顯著正相關(guān)；抗RNP抗體與雷諾現(xiàn)象、光敏感呈顯著正相關(guān)；抗DNP抗體與關(guān)節(jié)炎呈顯著正相關(guān)，與腎損害呈顯著負相關(guān)；抗Scl-70

5、抗體與貧血、雷諾現(xiàn)象呈顯著正相關(guān)；抗Jo-1抗體與心包炎呈顯著正相關(guān)；抗著絲?？贵w與雷諾現(xiàn)象呈顯著正相關(guān)。
　　 ⑵自身抗體聚類分析：根據(jù)抗提取核自身抗體(抗Sm、RNP、SSA、SSB抗體)把917例SLE患者分成3種亞型：亞型Ⅰ抗Ro、Sm、RNP抗體多陽性(簡稱[Ro/Sm/RNP])，50歲以下的人群好發(fā)，光敏感、面部紅斑/盤狀紅斑、雷諾現(xiàn)象、白細胞減少發(fā)生率高；亞型Ⅱ抗Ro抗體陽性(簡稱[Ro])，15歲以上的人群好發(fā)

6、，抗DNP陽性率高于亞型Ⅲ；亞型Ⅲ抗Sm、RNP、SSA、SSB抗體多陰性[簡稱[ENA Ve]]，ANA陽性率低于亞型Ⅰ和亞型Ⅱ。
　　 ⑶SLE患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+標記的Treg與CD4+CD25+CD127low/-標記的Treg在數(shù)量、與臨床表現(xiàn)和實驗室指標的相關(guān)性方面均有許多不同。
　　 ⑷SLE患者外周血Treg(CD4+CD25+Foxp3+T cells，下同)較健康對照組顯著增高，

7、然而表達CD62L或CTLA-4(CD152)的Treg亞群較健康對照組均顯著降低。
　　 ⑸SLE患者外周血Treg與血白細胞(WBC)、淋巴細胞(Ly)、血小板(PLT)呈顯著負相關(guān)；表達CD62L的Treg亞群與WBC和PLT均呈顯著負相關(guān)。Treg與血清免疫球蛋白IgM呈顯著負相關(guān)，與C反應蛋白(CRP)呈顯著正相關(guān)。其中表達CD62L的Treg亞群與IgG呈顯著負相關(guān)；表達CCR7和CCR7+CD62L+Treg亞群均

8、與ESR呈顯著負相關(guān)。
　　 ⑹SLE患者外周血中Treg與血清抗核抗體(ANA)、抗核小體抗體(AnuA)、抗組蛋白抗體(AHA)、抗雙鏈DNA抗體(dsDNA)均無顯著相關(guān)。表達CD45RA的Treg與AHA呈顯著負相關(guān)；表達CD62L的Treg亞群與AnuA、AHA、dsDNA均呈顯著負相關(guān)；CD45RA+CD62L+的Treg亞群與AnuA、AHA、dsDNA均呈顯著負相關(guān)；表達CCR7的Treg亞群、CD62L+CCR

9、7+的Treg亞群與AHA呈顯著負相關(guān)。
　　 ⑺有腎損的SLE患者外周血中Treg顯著高于無腎損組和健康對照組。有光敏感的SLE患者外周血中Treg顯著高于無光敏感組；無光敏感的SLE患者組中Treg較健康對照組顯著增高。有血液系統(tǒng)損傷的SLE患者外周血中表達CD45RA的Treg亞群較無血液系統(tǒng)損傷組和健康對照組均顯著降低。有神經(jīng)系統(tǒng)損傷的SLE患者外周血中的Treg顯著高于無神經(jīng)系統(tǒng)損傷組和健康對照組；無神經(jīng)系統(tǒng)損傷的SL

10、E患者組中的Treg顯著高于健康對照組。
　　 ⑻活動期和穩(wěn)定期SLE患者外周血中Treg均顯著高于健康對照組，而活動期SLE和穩(wěn)定期SLE患者間無顯著性差異；活動期SLE患者外周血中表達CD62L+的Treg亞群較穩(wěn)定期組和健康對照組均顯著降低；SLE活動組CD45RA+CD62L+的Treg亞群較穩(wěn)定期組和健康對照組均顯著降低；SLE患者外周血中表達CD62L的Treg亞群與SLEDAI有顯著性負相關(guān)。已治療的SLE患者外周

11、血中的Treg顯著高于SLE未治組和健康對照組；未治SLE患者Treg與健康對照組間無顯著性差異。
　　 結(jié)論：①我國SLE患者具有3種不同的自身抗體亞型和特殊的臨床表現(xiàn)與自身抗體的相關(guān)性，如抗RNP與光敏感呈顯著正相關(guān)，抗DNP與腎損害呈顯著負相關(guān)。②SLE患者外周血中以CD4+CD25+Foxp3+標記的Treg較以CD4+CD25+CD127low/-標記的Treg特異性強。③SLE患者機體炎癥和損傷可能通過刺激外周血中的