應(yīng)用AU和NP20芯片對大腸癌患者血清標(biāo)志物的篩選比較研究及聯(lián)合診斷模型的構(gòu)建.pdf

1、大腸癌(Colorectal Cancer，CRC)是最常見的消化道惡性腫瘤之一,發(fā)病率在全球人類高發(fā)腫瘤中位列第三,它包括結(jié)腸癌和直腸癌兩部分,具有高死亡率,高復(fù)發(fā)率和高轉(zhuǎn)移率的特點(diǎn),且預(yù)后較差,所以對其的及時診治就顯得尤為重要。目前在臨床上唯一被用來檢測大腸癌表達(dá)產(chǎn)物的是血清CEA檢測技術(shù),然而一方面,大量的測試需要大量的血清CEA,這直接導(dǎo)致了測試價格的昂貴;另一方面,它存在假陽性率和假陰性率高的問題,特異性和敏感度均較低,故其在

2、臨床上的診斷價值有限。
　　近年來,隨著蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步和發(fā)展,研究者以期通過此新技術(shù)找到更好的篩選和鑒定腫瘤的生物標(biāo)志物,從而在腫瘤治療中取得新突破。
　　本研究分別從兩種芯片出發(fā),即金芯片(Gold Chip)和正相親水(Normal Phase 20，NP20)芯片,采用分子流行病學(xué)(Molecular Epidemiology)的研究方法和理論,以中國人群為研究對象,創(chuàng)新性地結(jié)合磁珠與表面增強(qiáng)激光解析電離飛行

3、時間質(zhì)譜(SELDI-TOF-MS)技術(shù)檢測大腸癌患者血清蛋白質(zhì)組,包括篩選大腸癌血清候選標(biāo)志物:不同臨床分期大腸癌血清的差異表達(dá)蛋白篩選等;同時還探索性的研究了結(jié)腸癌和直腸癌之間的差異蛋白峰,試圖以蛋白質(zhì)組學(xué)的角度區(qū)分兩者.最后,應(yīng)用了決策樹建模分析法建立了兩種芯片的聯(lián)合診斷模型,初步探討了所建立的診斷模型在大腸癌早期診斷中的臨床意義,以期優(yōu)化實驗結(jié)果.
　　本文還比較分析了兩芯片的實驗結(jié)果并評價了本實驗中運(yùn)用的磁珠結(jié)合SELD

4、I-TOF-MS技術(shù),試圖為篩選腫瘤標(biāo)志物提供一個嶄新的研究思路和技術(shù)平臺.結(jié)果表明,癌癥組與正常組樣品間的差異非常顯著,從NP20和AU兩種芯片的分析結(jié)果來看,分別找到了m/z為13732.4和13912.3兩種峰能較好的把兩組樣品區(qū)分開,而兩個峰的位置相隔很近,推測這兩種顯著差異峰對應(yīng)的化合物比較相似,說明兩種芯片得到的結(jié)果較為吻合,它們有可能成為診斷大腸癌的新生物標(biāo)志物;結(jié)直腸癌早晚期的區(qū)別也很明顯;而相比之下,直腸癌與結(jié)腸癌的蛋

5、白表達(dá)區(qū)分不是很明顯。而兩種芯片建立的聯(lián)合診斷模型,其預(yù)測的準(zhǔn)確率有所提高,優(yōu)化了實驗結(jié)果.另外,通過實驗結(jié)果分析,磁珠結(jié)合SELDI蛋白芯片技術(shù)具有廉價,快速,靈敏度高,操作簡單等優(yōu)點(diǎn),故此實驗技術(shù)路線還是具有探討價值的.
　　綜上所述,本研究摸索并最終確定的最優(yōu)實驗條件可作為研究者們今后做相關(guān)實驗的一個重要技術(shù)路線參考依據(jù),而本研究最終建立的聯(lián)合診斷模型和篩選出的候選生物標(biāo)志物也可為將來將它們投入到實際臨床檢測中提供重要的理論