基于時(shí)藏理論的“腎主骨”與細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)性研究.pdf

1、時(shí)藏理論是中醫(yī)理論體系的核心內(nèi)容，它體現(xiàn)了中醫(yī)學(xué)固有的思維模式，從時(shí)藏理論入手研究“腎主骨”，以至于對藏象的實(shí)質(zhì)進(jìn)行研究都具有至關(guān)重要的意義。當(dāng)前，在中醫(yī)理論的指導(dǎo)下，充分運(yùn)用傳統(tǒng)方法和現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)(包括現(xiàn)代醫(yī)學(xué)技術(shù))去尋找中醫(yī)學(xué)對人體認(rèn)識的規(guī)律，用現(xiàn)代語言闡述中醫(yī)學(xué)的科學(xué)內(nèi)涵，為中醫(yī)學(xué)的發(fā)展服務(wù)，是中醫(yī)理論基礎(chǔ)研究在相當(dāng)一段時(shí)間內(nèi)的主要目標(biāo)。 1．目的：本課題擬從時(shí)藏理論的整體調(diào)控思想出發(fā)把中醫(yī)理論體系的傳統(tǒng)思維模式融入實(shí)驗(yàn)設(shè)

2、計(jì)和研究之中，以“腎主骨”生理功能的研究為切入點(diǎn)，對中醫(yī)藏象既基于實(shí)質(zhì)器官又高于實(shí)質(zhì)器官，以“時(shí)”測“藏”的內(nèi)涵進(jìn)行探討。通過把整體信息轉(zhuǎn)導(dǎo)觀念和松果腺與下屬靶腺及細(xì)胞信使相結(jié)合的研究方法，揭示“腎主骨”的實(shí)質(zhì)，并為中醫(yī)藏象學(xué)說的研究和臨床病證病理的深化及防治提供新的方向和靶點(diǎn)。 2．方法： 2.1理論研究：通過運(yùn)用方法論的三個層次，即哲學(xué)層次、一般方法論層次及具體方法論的層層遞進(jìn)的分析方法，對中醫(yī)“腎主骨”的中醫(yī)理論內(nèi)

3、涵和現(xiàn)代研究的實(shí)證進(jìn)行闡釋和分析。 2.2 臨床研究： 2.2.1設(shè)計(jì)思路： 中醫(yī)學(xué)臟腑的概念是解剖學(xué)、生理學(xué)及病理學(xué)的綜合涵義，尤其是系統(tǒng)功能的單位。中醫(yī)。腎對骨的作用，既有廣義之腎一甲狀腺軸的調(diào)節(jié)作用，又離不開解剖學(xué)狹義腎的參與。 2.2.2．一般資料以慢性腎功能衰竭尿毒癥的病人為觀察對象，按照診斷標(biāo)準(zhǔn)，納入標(biāo)準(zhǔn)及排除標(biāo)準(zhǔn)，選擇2006年中國中醫(yī)研究院西苑醫(yī)院維持性血透患者共39例。 2.2.

4、3調(diào)查指標(biāo)： 一般項(xiàng)目包括姓名、性別、年齡、患病時(shí)間、開始血透時(shí)間、中醫(yī)診斷、西醫(yī)診斷、本次血透時(shí)間等。調(diào)查項(xiàng)目包括腎功能指標(biāo)、生化指標(biāo)、血常規(guī)等。調(diào)查的各項(xiàng)臨床檢驗(yàn)指標(biāo)的時(shí)間以在夏至和冬至前后7天之內(nèi)的為準(zhǔn)。 2.2.4 統(tǒng)計(jì)方法： 運(yùn)用SPSS12.0分析軟件進(jìn)行T檢驗(yàn)和單因素方差分析。 2.3 實(shí)驗(yàn)研究： 2.3.1 設(shè)計(jì)思路： 本研究以“腎主骨，以應(yīng)冬氣”相關(guān)的甲狀腺軸和對光敏感的高位節(jié)律調(diào)節(jié)器松

5、果腺為切入點(diǎn)，選擇了完成跨膜信號轉(zhuǎn)換的重要信使cAMP、cGMP和IP<,3>為研究對象，來觀察生理狀態(tài)下的甲狀腺組織的形態(tài)學(xué)季節(jié)性改變的特點(diǎn)，以及季節(jié)性變化對骨代謝的影響。 2.3.2實(shí)驗(yàn)動物： SD大鼠，雄性，180—200 g/只。隨機(jī)分成生理組，手術(shù)組(結(jié)扎矢靜脈并摘除松果腺組)，偽手術(shù)組(結(jié)扎矢靜脈但不摘除松果腺組)。 2.3.3 檢測方法： IP<,3>含量測定，運(yùn)用放射免疫法；cAMP、cG

6、MP含量測定，運(yùn)用酶聯(lián)免疫法；甲狀腺組織形態(tài)學(xué)，運(yùn)用光鏡觀察；BGP含量測定，運(yùn)用放射免疫法；BALP及CICP含量測定，運(yùn)用酶聯(lián)免疫法。 2.3.4統(tǒng)計(jì)方法： 分析數(shù)據(jù)運(yùn)用SPSS12.0分析軟件進(jìn)行T檢驗(yàn)或單因素方差分析。 3．結(jié)果 3.1 理論研究結(jié)果 3.1.1 中醫(yī)時(shí)藏理論是整體觀這一思維模式所決定的，這種思維模式?jīng)Q定了中醫(yī)學(xué)認(rèn)識人體生命活動的角度注重整體性、統(tǒng)一性和聯(lián)系性，這種古樸的方

7、法論與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)新的醫(yī)學(xué)模式不謀而合，即“生理-心理-社會-環(huán)境”的模式。 3.1.2 中醫(yī)時(shí)藏理論中的兩個主要要素“時(shí)”與“藏”具有辯證的關(guān)系，“一切存在的基本形式是空間和時(shí)間。” (恩格斯語)。“時(shí)”作用于“藏”而影響其功能活動，“藏”既是接受“時(shí)”的各種信息的靶點(diǎn)，同時(shí)又具有時(shí)空的某些特征，時(shí)藏理論是中醫(yī)學(xué)理論體系的核心。 3.1.3 從中醫(yī)時(shí)藏理論認(rèn)識中醫(yī)腎整體調(diào)控順時(shí)適應(yīng)性調(diào)節(jié)的內(nèi)在機(jī)制，應(yīng)用系統(tǒng)論的觀點(diǎn)得以全面

8、詮釋。整體性原則、有序性原則、互相聯(lián)系性原則與動態(tài)性原則也正是中醫(yī)腎整體調(diào)控系統(tǒng)的特點(diǎn)所在。 3.1.4從“腎主骨”理論現(xiàn)代研究的內(nèi)涵中發(fā)現(xiàn)：腎與骨在胚胎發(fā)生學(xué)的同源性和分子生物學(xué)水平的相關(guān)性表明二者是密切相關(guān)的，解剖學(xué)狹義的腎與甲狀腺軸功能的廣義的腎對骨代謝的作用，以及腎對骨順時(shí)適應(yīng)性的調(diào)節(jié)實(shí)證了“腎”系統(tǒng)功能性單元的內(nèi)涵。 3.1.5 基于時(shí)藏理論的“腎主骨”與細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的相關(guān)性工作假說：“腎主骨"是中醫(yī)腎整體調(diào)控

9、順時(shí)適應(yīng)性調(diào)節(jié)作用的具體體現(xiàn)形式，以冬季光照時(shí)間短這一外界刺激因素作為激發(fā)源，激活第二信使來傳遞外界的信息，引發(fā)體內(nèi)器官形態(tài)及功能的變化，進(jìn)而產(chǎn)生與冬季相應(yīng)的生理效應(yīng)。 3.2 臨床研究結(jié)果 3.2.1 冬夏季節(jié)對腎性骨病腎功能的影響CREA與BUN明顯高于正常值，呈現(xiàn)冬高夏低的季節(jié)性變化趨勢。BUN冬夏季節(jié)比較有顯著性差異，P<0.05。 3.2.2 冬夏季節(jié)對腎l生骨病甲狀旁腺激素的影響PTH冬夏季節(jié)比較統(tǒng)計(jì)

10、學(xué)上無差異，數(shù)值呈現(xiàn)冬高夏低季節(jié)性變化趨勢。 3.2.3 冬夏季節(jié)對腎性骨病血常規(guī)的影響WBC、RBC、HB無冬夏季節(jié)比較統(tǒng)計(jì)學(xué)上無差異，但HB與正常值比較呈現(xiàn)明顯下降的趨勢。 3.3.4 冬夏季節(jié)對腎性骨病生化指標(biāo)的影響除了CL冬夏季節(jié)比較有顯著性差異，P<0.05外，其它指標(biāo)冬夏季節(jié)比較統(tǒng)計(jì)學(xué)上無差異，但血P含量呈現(xiàn)高于正常值的變化趨勢。 3.3實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果 3.3.1 冬夏季節(jié)對機(jī)體IP<,3>細(xì)胞

11、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)物質(zhì)的影響正常對照組：下丘腦IP<,3>含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.05；甲狀腺IP<,3>含量呈現(xiàn)冬低夏高，P<0.01。 摘除松果腺手術(shù)組：下丘腦與甲狀腺正常冬夏季節(jié)差異消失。 3.3.2 冬夏季節(jié)對機(jī)體cAMP、cGMP細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)物質(zhì)的影響cAMP：正常對照組：下丘腦cAMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01，偽手術(shù)組cAMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01。 垂體cAMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0

12、.05，偽手術(shù)組cAMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01。 甲狀腺cAMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01，偽手術(shù)組cAMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01。 摘除松果腺手術(shù)組：下丘腦、垂體正常冬夏季節(jié)差異消失。甲狀腺冬夏手術(shù)組之間有顯著性差異，P<0.01cGMP：正常對照組：下丘腦cGMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01，偽手術(shù)組cGMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01。 垂體cGMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<

13、0.05。 甲狀腺cGMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01，偽手術(shù)組cGMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01。 摘除松果腺手術(shù)組：下丘腦冬夏手術(shù)組之間有顯著性差異，P<0.01；垂體冬夏手術(shù)組之間有顯著性差異，P<0.05；甲狀腺正常冬夏季節(jié)差異消失。 cAMP/cGMP：正常對照組：下丘腦、垂體及甲狀腺cAMP與cGMP含量相比較均有cAMP高cGMP低的變化，cAMP/cGMP下丘腦、垂體及甲狀腺均無顯著性差

14、異，P>0.05，但甲狀腺的cAMP/cGMP同樣呈現(xiàn)冬低夏高的變化趨勢。 摘除松果腺手術(shù)組：手術(shù)組垂體cAMP/cGMP數(shù)值顯示冬夏季節(jié)性消失。 3.3.3 冬夏季節(jié)對機(jī)體血清骨代謝的影響生理組CICP含量呈現(xiàn)冬高夏低的變化趨勢：BALP含量呈現(xiàn)冬高夏低，P<0.01；BGP含量冬夏之間無差異，P>0.05；CICP、BALP及BGP手術(shù)組冬夏季節(jié)性消失。四時(shí)模擬冬至組與夏至比較無差異，P>0.05，但CICP、BAL

15、P呈現(xiàn)冬高夏低變化趨勢。 3.3.4 冬夏季節(jié)對機(jī)體甲狀腺組織的影響冬夏季節(jié)對正常對照組甲狀腺組織的影響有差異，對摘除松果腺手術(shù)組影響不大。 3.3.5 基于時(shí)藏理論的“腎主骨”工作機(jī)制大體模型： 冬季光照時(shí)間的縮短，經(jīng)過視網(wǎng)膜一下丘腦視交叉上核一松果腺途徑，促使松果腺分泌較多的褪黑素。MT通過位于細(xì)胞膜上高親和性G蛋白偶聯(lián)受體直接作用于甲狀腺軸，啟動細(xì)胞內(nèi)第二信使系統(tǒng)。通過抑制cAMP的生理反應(yīng)，調(diào)節(jié)IP<,3

16、>的代謝活動而調(diào)整細(xì)胞的生理效應(yīng)，甲狀腺組織的形態(tài)學(xué)改變以使甲狀腺激素分泌增加，進(jìn)而引起骨代謝指標(biāo)BALP、CICP水平的增加以加強(qiáng)成骨細(xì)胞代謝，同時(shí)T<,3>還可以調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞的活性，最終結(jié)果使骨代謝活性的增強(qiáng)表明骨貯藏物質(zhì)與能量以應(yīng)冬氣，并為春生、夏長做準(zhǔn)備。 4．結(jié)論 本研究從細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的角度探討冬夏季節(jié)甲狀腺軸對骨代謝的調(diào)節(jié)作用，結(jié)果表明：下丘腦、垂體、甲狀腺由于冬夏季節(jié)的變化表現(xiàn)有第二信使的季節(jié)性變化特點(diǎn)，并