基于時藏理論的“腎主骨”與細胞信號轉導相關性研究.pdf

1、時藏理論是中醫(yī)理論體系的核心內容，它體現(xiàn)了中醫(yī)學固有的思維模式，從時藏理論入手研究“腎主骨”，以至于對藏象的實質進行研究都具有至關重要的意義。當前，在中醫(yī)理論的指導下，充分運用傳統(tǒng)方法和現(xiàn)代科學技術(包括現(xiàn)代醫(yī)學技術)去尋找中醫(yī)學對人體認識的規(guī)律，用現(xiàn)代語言闡述中醫(yī)學的科學內涵，為中醫(yī)學的發(fā)展服務，是中醫(yī)理論基礎研究在相當一段時間內的主要目標。 1．目的：本課題擬從時藏理論的整體調控思想出發(fā)把中醫(yī)理論體系的傳統(tǒng)思維模式融入實驗設

2、計和研究之中，以“腎主骨”生理功能的研究為切入點，對中醫(yī)藏象既基于實質器官又高于實質器官，以“時”測“藏”的內涵進行探討。通過把整體信息轉導觀念和松果腺與下屬靶腺及細胞信使相結合的研究方法，揭示“腎主骨”的實質，并為中醫(yī)藏象學說的研究和臨床病證病理的深化及防治提供新的方向和靶點。 2．方法： 2.1理論研究：通過運用方法論的三個層次，即哲學層次、一般方法論層次及具體方法論的層層遞進的分析方法，對中醫(yī)“腎主骨”的中醫(yī)理論內

3、涵和現(xiàn)代研究的實證進行闡釋和分析。 2.2 臨床研究： 2.2.1設計思路： 中醫(yī)學臟腑的概念是解剖學、生理學及病理學的綜合涵義，尤其是系統(tǒng)功能的單位。中醫(yī)。腎對骨的作用，既有廣義之腎一甲狀腺軸的調節(jié)作用，又離不開解剖學狹義腎的參與。 2.2.2．一般資料以慢性腎功能衰竭尿毒癥的病人為觀察對象，按照診斷標準，納入標準及排除標準，選擇2006年中國中醫(yī)研究院西苑醫(yī)院維持性血透患者共39例。 2.2.

4、3調查指標： 一般項目包括姓名、性別、年齡、患病時間、開始血透時間、中醫(yī)診斷、西醫(yī)診斷、本次血透時間等。調查項目包括腎功能指標、生化指標、血常規(guī)等。調查的各項臨床檢驗指標的時間以在夏至和冬至前后7天之內的為準。 2.2.4 統(tǒng)計方法： 運用SPSS12.0分析軟件進行T檢驗和單因素方差分析。 2.3 實驗研究： 2.3.1 設計思路： 本研究以“腎主骨，以應冬氣”相關的甲狀腺軸和對光敏感的高位節(jié)律調節(jié)器松

5、果腺為切入點，選擇了完成跨膜信號轉換的重要信使cAMP、cGMP和IP<,3>為研究對象，來觀察生理狀態(tài)下的甲狀腺組織的形態(tài)學季節(jié)性改變的特點，以及季節(jié)性變化對骨代謝的影響。 2.3.2實驗動物： SD大鼠，雄性，180—200 g/只。隨機分成生理組，手術組(結扎矢靜脈并摘除松果腺組)，偽手術組(結扎矢靜脈但不摘除松果腺組)。 2.3.3 檢測方法： IP<,3>含量測定，運用放射免疫法；cAMP、cG

6、MP含量測定，運用酶聯(lián)免疫法；甲狀腺組織形態(tài)學，運用光鏡觀察；BGP含量測定，運用放射免疫法；BALP及CICP含量測定，運用酶聯(lián)免疫法。 2.3.4統(tǒng)計方法： 分析數(shù)據(jù)運用SPSS12.0分析軟件進行T檢驗或單因素方差分析。 3．結果 3.1 理論研究結果 3.1.1 中醫(yī)時藏理論是整體觀這一思維模式所決定的，這種思維模式決定了中醫(yī)學認識人體生命活動的角度注重整體性、統(tǒng)一性和聯(lián)系性，這種古樸的方

7、法論與現(xiàn)代醫(yī)學新的醫(yī)學模式不謀而合，即“生理-心理-社會-環(huán)境”的模式。 3.1.2 中醫(yī)時藏理論中的兩個主要要素“時”與“藏”具有辯證的關系，“一切存在的基本形式是空間和時間。” (恩格斯語)?！皶r”作用于“藏”而影響其功能活動，“藏”既是接受“時”的各種信息的靶點，同時又具有時空的某些特征，時藏理論是中醫(yī)學理論體系的核心。 3.1.3 從中醫(yī)時藏理論認識中醫(yī)腎整體調控順時適應性調節(jié)的內在機制，應用系統(tǒng)論的觀點得以全面

8、詮釋。整體性原則、有序性原則、互相聯(lián)系性原則與動態(tài)性原則也正是中醫(yī)腎整體調控系統(tǒng)的特點所在。 3.1.4從“腎主骨”理論現(xiàn)代研究的內涵中發(fā)現(xiàn)：腎與骨在胚胎發(fā)生學的同源性和分子生物學水平的相關性表明二者是密切相關的，解剖學狹義的腎與甲狀腺軸功能的廣義的腎對骨代謝的作用，以及腎對骨順時適應性的調節(jié)實證了“腎”系統(tǒng)功能性單元的內涵。 3.1.5 基于時藏理論的“腎主骨”與細胞信號轉導的相關性工作假說：“腎主骨"是中醫(yī)腎整體調控

9、順時適應性調節(jié)作用的具體體現(xiàn)形式，以冬季光照時間短這一外界刺激因素作為激發(fā)源，激活第二信使來傳遞外界的信息，引發(fā)體內器官形態(tài)及功能的變化，進而產生與冬季相應的生理效應。 3.2 臨床研究結果 3.2.1 冬夏季節(jié)對腎性骨病腎功能的影響CREA與BUN明顯高于正常值，呈現(xiàn)冬高夏低的季節(jié)性變化趨勢。BUN冬夏季節(jié)比較有顯著性差異，P<0.05。 3.2.2 冬夏季節(jié)對腎l生骨病甲狀旁腺激素的影響PTH冬夏季節(jié)比較統(tǒng)計

10、學上無差異，數(shù)值呈現(xiàn)冬高夏低季節(jié)性變化趨勢。 3.2.3 冬夏季節(jié)對腎性骨病血常規(guī)的影響WBC、RBC、HB無冬夏季節(jié)比較統(tǒng)計學上無差異，但HB與正常值比較呈現(xiàn)明顯下降的趨勢。 3.3.4 冬夏季節(jié)對腎性骨病生化指標的影響除了CL冬夏季節(jié)比較有顯著性差異，P<0.05外，其它指標冬夏季節(jié)比較統(tǒng)計學上無差異，但血P含量呈現(xiàn)高于正常值的變化趨勢。 3.3實驗研究結果 3.3.1 冬夏季節(jié)對機體IP<,3>細胞

11、信號轉導物質的影響正常對照組：下丘腦IP<,3>含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.05；甲狀腺IP<,3>含量呈現(xiàn)冬低夏高，P<0.01。 摘除松果腺手術組：下丘腦與甲狀腺正常冬夏季節(jié)差異消失。 3.3.2 冬夏季節(jié)對機體cAMP、cGMP細胞信號轉導物質的影響cAMP：正常對照組：下丘腦cAMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01，偽手術組cAMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01。 垂體cAMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0

12、.05，偽手術組cAMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01。 甲狀腺cAMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01，偽手術組cAMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01。 摘除松果腺手術組：下丘腦、垂體正常冬夏季節(jié)差異消失。甲狀腺冬夏手術組之間有顯著性差異，P<0.01cGMP：正常對照組：下丘腦cGMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01，偽手術組cGMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01。 垂體cGMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<

13、0.05。 甲狀腺cGMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01，偽手術組cGMP含量表現(xiàn)為冬低夏高，P<0.01。 摘除松果腺手術組：下丘腦冬夏手術組之間有顯著性差異，P<0.01；垂體冬夏手術組之間有顯著性差異，P<0.05；甲狀腺正常冬夏季節(jié)差異消失。 cAMP/cGMP：正常對照組：下丘腦、垂體及甲狀腺cAMP與cGMP含量相比較均有cAMP高cGMP低的變化，cAMP/cGMP下丘腦、垂體及甲狀腺均無顯著性差

14、異，P>0.05，但甲狀腺的cAMP/cGMP同樣呈現(xiàn)冬低夏高的變化趨勢。 摘除松果腺手術組：手術組垂體cAMP/cGMP數(shù)值顯示冬夏季節(jié)性消失。 3.3.3 冬夏季節(jié)對機體血清骨代謝的影響生理組CICP含量呈現(xiàn)冬高夏低的變化趨勢：BALP含量呈現(xiàn)冬高夏低，P<0.01；BGP含量冬夏之間無差異，P>0.05；CICP、BALP及BGP手術組冬夏季節(jié)性消失。四時模擬冬至組與夏至比較無差異，P>0.05，但CICP、BAL

15、P呈現(xiàn)冬高夏低變化趨勢。 3.3.4 冬夏季節(jié)對機體甲狀腺組織的影響冬夏季節(jié)對正常對照組甲狀腺組織的影響有差異，對摘除松果腺手術組影響不大。 3.3.5 基于時藏理論的“腎主骨”工作機制大體模型： 冬季光照時間的縮短，經過視網膜一下丘腦視交叉上核一松果腺途徑，促使松果腺分泌較多的褪黑素。MT通過位于細胞膜上高親和性G蛋白偶聯(lián)受體直接作用于甲狀腺軸，啟動細胞內第二信使系統(tǒng)。通過抑制cAMP的生理反應，調節(jié)IP<,3

16、>的代謝活動而調整細胞的生理效應，甲狀腺組織的形態(tài)學改變以使甲狀腺激素分泌增加，進而引起骨代謝指標BALP、CICP水平的增加以加強成骨細胞代謝，同時T<,3>還可以調節(jié)破骨細胞的活性，最終結果使骨代謝活性的增強表明骨貯藏物質與能量以應冬氣，并為春生、夏長做準備。 4．結論 本研究從細胞信號轉導的角度探討冬夏季節(jié)甲狀腺軸對骨代謝的調節(jié)作用，結果表明：下丘腦、垂體、甲狀腺由于冬夏季節(jié)的變化表現(xiàn)有第二信使的季節(jié)性變化特點，并