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文檔簡介
1、目的:
觀察乳腺癌細(xì)胞非p53依賴途徑中c-myc突變型(T58A)與野生型(WT)通過p21Cipl對Bim基因調(diào)控及細(xì)胞凋亡的影響。
方法:
攜帶c-myc T58A與WT基因慢病毒表達(dá)載體分別感染乳腺癌細(xì)胞株HCC1937并培養(yǎng)二者穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株,未感染者及僅感染慢病毒者為空白及感染對照組。慢病毒p21Cipl/siRNA載體感染以上各組細(xì)胞,RT-PCR和western blot檢測感染
2、前后各組c-myc、p21Cipl、Bim的mRNA和蛋白表達(dá),TUNEL檢測細(xì)胞凋亡。
結(jié)果:
PCR與western blot法均顯示c-myc T58A與WT基因mRNA和蛋白過表達(dá),且c-myc T58A組p21Cipl表達(dá)量顯著增多,Bim表達(dá)量明顯降低,凋亡率顯著低于其他組(P均<0.001)。感染p21Cipl/siRNA后,各自組內(nèi)Bim含量均較前上升且凋亡率明顯提高(P均<0.05)。
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