環(huán)介導(dǎo)等溫擴增檢測下呼吸道感染致病菌的研究.pdf

1、目的： 建立應(yīng)用環(huán)介導(dǎo)等溫擴增(Loop-mediated isothermal amplification，LAMP)檢測下呼吸道感染常見致病菌的方法，并將該法應(yīng)用于臨床痰樣本的檢測，同時與痰培養(yǎng)法比較，探討該法在下呼吸道感染診斷中的應(yīng)用價值；據(jù)LAMP法的結(jié)果分析呼吸科下呼吸道感染的病原菌分布，為臨床經(jīng)驗治療提供依據(jù)。 方法： 1．選擇下呼吸道感染常見的11種病原菌：肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠

2、假單胞菌、肺炎克雷白桿菌、流感嗜血桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌、鮑曼不動桿菌、軍團菌、肺炎支原體、肺炎衣原體為檢測菌株。通過BLAST、Align X和Primer5.0程序設(shè)計合成本實驗所需引物； 2．收集內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院呼吸科診斷為下呼吸道感染患者的合格痰標本100例，提取痰樣品DNA進行等溫擴增及實時熒光檢測，測定熔解曲線，進行數(shù)據(jù)分析，同時測試該檢測體系的靈敏度和特異性；比較LAMP法與痰培養(yǎng)的結(jié)果； 3．據(jù)L

3、AMP法的結(jié)果分析呼吸科下呼吸道感染的病原菌分布。 結(jié)果： 1．該檢測體系的靈敏度高、特異性好，LAMP法和培養(yǎng)法陽性率分別為64％和25％，差異有顯著性(P＜0.05)； 2．呼吸科下呼吸道感染病原菌的分布，細菌占75.9％、非典型病原菌占24.1％；革蘭陰性桿菌為主要致病菌(57.5％)，前三位依次為鮑曼不動桿菌、銅綠假單胞菌、肺炎克雷白桿菌。 結(jié)論： LAMP法是一種敏感、高效的下呼吸道感染