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1、近年來,由于抗生素的長(zhǎng)期和高劑量使用,許多菌株對(duì)其產(chǎn)生耐藥性,甚至出現(xiàn)了能夠耐受幾乎所有抗生素的“超細(xì)菌”。因此,尋找一種能夠替代抗生素的藥物迫在眉睫。抗菌肽是宿主先天防御系統(tǒng)的重要組成成分,而來自人皮膚的抗菌肽在抗感染的第一道防線中起主要作用。由于抗菌肽的使用不易產(chǎn)生耐藥和交叉抗性,且具有抗細(xì)菌、真菌、病毒、原生動(dòng)物、后生動(dòng)物寄生物及腫瘤等活性,因此其將有望成為替代普通抗生素的一類新型藥物。 為了能快速并低成本地獲得Dermc
2、idin,首先我們將Dermcidin基因克隆到畢赤酵母載體pPIC9中,并在畢赤酵母GS115中進(jìn)行表達(dá)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示畢赤酵母GS115系統(tǒng)所表達(dá)的Dermcidin在pH5.5~7.4范圍內(nèi)具有抗大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的活性。這個(gè)結(jié)果說明在畢赤酵母中表達(dá)的DCD-1L能夠抗部分革蘭氏陰性和陽性細(xì)菌。 抗菌肽是宿主先天防御系統(tǒng)的重要組成成分,雖然我們對(duì)其在體外的一些理化性質(zhì)、結(jié)構(gòu)和功能作了一些研究,但是對(duì)其在人體中如何行使其
3、功能,達(dá)到殺死人體致病菌的機(jī)理知之甚少。特別是對(duì)一些重要的革蘭氏陽性致病菌能夠感應(yīng)抗菌肽來調(diào)節(jié)其致病因子的表達(dá)而達(dá)到抵抗抗菌肽的機(jī)理缺乏理解。陽離子抗菌肽主要通過其所帶正電荷行使其功能,而細(xì)菌通過改變其細(xì)胞膜所帶的負(fù)電荷來抵抗陽離子抗菌肽。但是,到目前為止,我們對(duì)來自人的陰離子抗菌肽的作用機(jī)制及革蘭氏陽性菌如何抵抗陰離子抗菌肽一無所知。在這里,我們研究了在人皮膚上定居的、重要的醫(yī)院感染病原體一表皮葡萄球菌對(duì)來自人的陰離子抗菌肽Dermc
4、idin的適應(yīng)性應(yīng)答。我們發(fā)現(xiàn)Dermcidin能夠誘導(dǎo)表皮葡萄球菌的綜合調(diào)節(jié)系統(tǒng)的分化表達(dá),導(dǎo)致胞外蛋白酶的蛋白降解活性增加,從而使表皮葡萄球菌能降解Dermcidin,達(dá)到抵抗Dermcidin的目的。相似的,Dermcidin能夠刺激高毒性,獲得性耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌菌株MW2和LAC的胞外蛋白酶的活性。葡萄球菌對(duì)Dermcidin的這種對(duì)策是葡萄球菌能夠成功地定居在人表皮細(xì)胞上成為感染源的重要因素??傊覀兊难芯空f明了革
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