內源性雄激素、雄激素受體水平及雄激素受體CAG重復序列多態(tài)性與老年男性冠心病的相關性研究.pdf

1、冠心病的發(fā)病模式存在性別差異，其內在機制至今仍不清楚。增齡和男性性別是冠心病最強的獨立危險因素。雄激素水平隨年齡增加而降低，老年男性常伴有遲發(fā)性性腺機能減退，對整體健康狀況有不良影響。已有資料顯示男性低睪酮水平與多種心血管危險因素有關，包括高血壓、血脂異常、肥胖、糖尿病及代謝綜合征等。而冠心病發(fā)病率隨著增齡而增加。探討內源性雄激素水平的年齡變化趨勢與冠心病的相關性及潛在機制是近些年研究的熱點。現(xiàn)有大量證據表明雄激素不足促進心血管病的發(fā)生

2、和發(fā)展。但由于缺乏大型流行病學和臨床對比研究，關于雄激素不足與心血管病之間的關系還沒有定論。雄激素的生理作用可以分為非基因組作用和由雄激素受體介導的基因組作用。目前已經證實脈管系統(tǒng)的各種細胞成分中均有AR表達。從位于細胞核內，屬于配體活化的轉錄因子。雄激素受體基因轉錄活性的細微調節(jié)由AR NH2-端多聚谷氨酰胺（Gln）n長度的變化決定，多聚谷氨酰胺片段的大小與受體的轉錄功能負相關。該片段是由AR基因外顯子-1的三核苷酸（cytosin

3、e，adenine，guanine，CAG）重復序列編碼。在正常人群中AR CAG重復數(shù)呈高度多態(tài)性。有研究顯示這種基因多態(tài)性對雄激素水平、雄激素受體表達水平及AR活性有調節(jié)作用。AR基因CAG重復序列多態(tài)性對雄激素受體轉錄活性的調節(jié)，可能導致雄激素對這些靶細胞的效應發(fā)生改變。在此基礎上，有學者推測CAG重復序列可能是男性動脈粥樣硬化的一種遺傳學標志。鑒于我國已進入人口老齡化社會，冠心病在老年人群的高發(fā)病率和高死亡率給社會醫(yī)療帶來沉重的

4、負擔，進一步研究雄激素與男性冠心病的相關性及潛在機制十分必要，本研究擬在內源性雄激素水平一雄激素受體一雄激素受體基因多態(tài)性三個層次加以探討，為冠心病的防治方法提供新的思路。
　　 目的：
　　 1 探討內源性雄激素水平與老年男性冠心病的相關性；
　　 2 探討AR CAG重復序列多態(tài)性與老年男性冠心病的相關性及影響因素；
　　 3 初步推測內源性雄激素參與老年男性冠心病發(fā)生的可能機制。
　　 研究

5、對象
　　 連續(xù)入選有冠狀動脈造影證據的老年男性（≥60歲）296例，年齡在60～86歲之間。冠心病組（至少有1支冠狀動脈存在≥50％的動脈粥樣硬化性狹窄病變）237例，平均年齡68.6±6.8歲；對照組（冠狀動脈造影陰性）59例，平均年齡66.2±6.48歲。排除前列腺癌、PSA異常升高（>4ng/ml）及正在使用睪酮或雌激素治療者。
　　 方法
　　 1 采空腹外周靜脈血，分離血清，分別檢測FT、TT、E：、

6、LH、FSH、SHBG及DHEA七種性激素水平。FT的檢測使用酶聯(lián)免疫法，其他6個指標采用化學發(fā)光免疫分析法進行檢測。
　　 2 采空腹外周靜脈血，EDTA抗凝，經溶血、分離得到白細胞，以間接免疫熒光標記法標記AR受體，流式細胞術檢測淋巴細胞的雄激素受體水平（以AR陽性率表示）。
　　 3 酚/氯仿核酸抽提法提取全血基因組DNA，采用熒光標記引物進行目的片段PCR擴增，得到含有CAG重復序列多態(tài)性位點的特異性PCR產物。

7、所得產物進行微衛(wèi)星掃描分析及STR分型，根據參照序列計算得到相應標本的CAG重復數(shù)。
　　 結果：
　　 1 與對照組比較，冠心病組FT、TT、SHBG、DHEA、AR陽性率水平降低，LH、FSH和E2水平升高，但均無統(tǒng)計學意義。冠心病組AR CAG重復數(shù)明顯低于對照組，短AR者[（CAG）n<22]所占比例明顯高于對照組。短AR組的FT水平明顯低于長AR組，其他六種性激素水平無明顯差異。
　　 2 單因素分析顯

8、示，F(xiàn)T與年齡、FSH水平負相關；TT與BMI、LH、FSH負相關；DEHA與年齡、LH、FSH負相關；SHBG與BMI負相關，與年齡、LH、FSH正相關；E2與BMI正相關，與FSH、LH負相關；AR陽性率與年齡負相關；CAG重復數(shù)與FT、TT、DHEA、SHBG、E2及AR陽性率均無明確相關性。
　　 3 分層分析顯示，冠心病合并肥胖+超重者TT和SHBG水平明顯低于體重正常者，冠心病合并高血壓病者SHBG水平明顯低于無高血

9、壓病者。冠心病合并糖尿病者與對照組無糖尿病者比較，TT、FT水平明顯減低；冠心病合并肥胖+超重者與對照組體重正常者比較，TT水平明顯減低。
　　 4 對可能影響FT水平的因素進行多元線性回歸分析顯示：年齡、FSH、E2與FT水平負相關。對可能影響AR水平的因素進行多元線性回歸分析顯示：年齡與AR陽性率負相關，而FT與之正相關。
　　 5 短AR組合并雙支病變者顯著多于長AR組（P<0.05）；短AR組存在單支、雙支及三支

10、以上血管病變時FT水平都低于長AR組，但未達統(tǒng)計學意義，僅雙支病變時FT水平降低接近統(tǒng)計學顯著性（P=0.05）。
　　 6 對冠心病的傳統(tǒng)危險因素、性激素水平、AR陽性率及AR CAG重復數(shù)分組[短AR組（CAG）n<22，長AR組（CAG）n≥22]的Logistic回歸分析顯示：年齡、短AR和FT與冠心病的發(fā)病危險有顯著相關性（OR=1.06，P=0.0297；OR=2.04，P=0.0263；OR=0.98，P=0.00

11、49）.但當以AR CAG重復數(shù)數(shù)值替代按長短分組進行分析時，CAG重復數(shù)與冠心病發(fā)病危險無相關性。短AR與冠心病的相關性不依賴對血清FT和外周血淋巴細胞AR表達的調節(jié)作用。
　　 結論：
　　 1 隨著年齡增加，老年男性的FT、TT、DHEA、E2水平及外周血淋巴細胞AR表達水平下降，而SHBG水平升高。
　　 2 內源性FT水平與冠心病負相關，是獨立的保護因素；而年齡和短AR與冠心病正相關，增加發(fā)病危險。外周