雄激素受體基因、性激素結(jié)合球蛋白基因多態(tài)性、指長比與PCOS的關(guān)聯(lián)性研究.pdf

1、背景和目的：多囊卵巢綜合征(PCOS)是育齡期女性常見的一種高度異質(zhì)性的內(nèi)分泌代謝紊亂性疾病，臨床表現(xiàn)多種多樣，典型的表現(xiàn)為不同程度的月經(jīng)異常、卵巢多囊性改變、高雄激素血癥、不孕、多毛、痤瘡、肥胖等，并常伴有隨年齡增長而日益明顯的胰島素抵抗、高胰島素血癥和高脂血癥，常合并2型糖尿病和心血管疾病。迄今為止，PCOS的病因尚不清楚，其明顯的家族聚集性提示遺傳因素在PCOS的發(fā)病中起重要作用，由于臨床表現(xiàn)的異質(zhì)性，多數(shù)研究認(rèn)為:PCOS很可能

2、是少數(shù)幾個(gè)關(guān)鍵基因與微效基因共同作用，這種遺傳易感性與環(huán)境因素相互作用而發(fā)病的，而且對(duì)于不同種族，不同家庭，起關(guān)鍵作用的基因可能不同。國外對(duì)PCOS的多種基因進(jìn)行了研究，結(jié)果不盡相同，國內(nèi)對(duì)PCOS的致病基因研究不多。國外學(xué)者還研究表明指長比有性別、種族和地域差異，與個(gè)體攻擊性行為、艾滋病病毒易感性、心肌梗塞、乳腺癌、精子數(shù)量、及同性戀等有關(guān)，但國內(nèi)研究較少。
　　本課題針對(duì)PCOS常見的高雄激素血癥的內(nèi)分泌特征，選擇與雄激素有關(guān)

3、的雄激素受體(AR)基因和性激素結(jié)合球蛋白（SHBG）基因進(jìn)行研究，旨在探討AR基因微衛(wèi)星（CAG）n多態(tài)性和SHBG基因（TAAAA）n多態(tài)性與PCOS發(fā)病及臨床特征的關(guān)系，尋找PCOS的致病基因，以期為PCOS的預(yù)防和治療提供理論基礎(chǔ)。同時(shí)研究指長比與PCOS的相關(guān)性，以期為國內(nèi)女性PCOS患者的早期篩選、診斷和預(yù)防提供一定的理論依據(jù)。
　　方法:收集2008年10月-2010年4月在寧夏醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心就診的PC

4、OS患者191例作為PCOS組，并與PCOS患者同時(shí)期因單純輸卵管因素或男性因素不孕就診的70名女性作為對(duì)照組。所有女性均排除其他內(nèi)分泌疾患，近3月內(nèi)未使用激素類藥物，行血清性激素水平、空腹血糖、餐后2小時(shí)血糖、空腹胰島素、餐后2小時(shí)胰島素水平及血脂水平測定。并且記錄月經(jīng)、痤瘡及脂肪肝的發(fā)生情況，測量體重、身高、腰圍、臀圍、血壓、計(jì)算體重指數(shù)(BMI)、腰臀比、胰島素抵抗(IR)、按照是否存在高雄激素血癥將PCOS患者分為高雄激素組和雄

5、激素水平正常組；按照是否存在胰島素抵抗分為胰島素抵抗組和非胰島素抵抗組；按照BMI分為肥胖組和非肥胖組。對(duì)照組測定血清性激素水平及血脂水平。對(duì)各指標(biāo)進(jìn)行比較。從血液標(biāo)本中提取DNA，PCR擴(kuò)增所有標(biāo)本的雄激素受體AR基因的CAG微衛(wèi)星片段和性激素結(jié)合球蛋白SHBG基因的TAAAA片段，分別進(jìn)行瓊脂糖凝膠、毛細(xì)管電泳檢測目的基因產(chǎn)物，對(duì)目的基因測序確定CAG和TAAAA重復(fù)次數(shù)。測量左右手第2-5指長度（掌側(cè)），并計(jì)算各手指間的指長比值。

6、
　　結(jié)果：1.PCOS患者的臨床資料分析
　　1.1PCOS組于正常對(duì)照組比較，兩組的年齡、初潮年齡、收縮壓、舒張壓、FSH、PRL、E2、CHOL、LDL、HDL之間沒有差異,月經(jīng)周期、腰圍、臀圍、WHR、BMI、痤瘡發(fā)生率、LH、T、TG之間有差異，PCOS組均大于正常對(duì)照組。
　　1.2PCOS患者高雄激素組和雄激素正常組比較，兩組的年齡、空腹胰島素、空腹血糖、餐后2小時(shí)血糖、LH、FSH、PRL、E2均無差異

7、,餐后2小時(shí)胰島素、T、BMI有差異，PCOS組均大于正常對(duì)照組。
　　1.3PCOS患者胰島素抵抗組與胰島素非抵抗組比較，兩組的年齡、E2、FSH、LH、PRL水平之間沒有差異，而胰島素抵抗組的PCOS患者的T、BMI、WHR和兩個(gè)時(shí)點(diǎn)的血糖及胰島素水平均高于胰島素非抵抗組的PCOS患者，且差異有顯著性。在高雄激素組中存在胰島素抵抗的患者例數(shù)與雄激素正常組中存在的胰島素抵抗的患者的例數(shù)有差異，高雄激素組例數(shù)高于雄激素正常組例數(shù)。

8、
　　1.4PCOS患者肥胖組與非肥胖組比較，兩組患者的年齡、空腹血糖、餐后2小時(shí)血糖、E2、FSH、LH、PRL水平之間沒有差異，而空腹胰島素、餐后2小時(shí)胰島素、IR、T、BMI、WHR之間有差異，肥胖組均大于非肥胖組。
　　2.AR基因(CAG)n重復(fù)次數(shù)與多囊卵巢綜合征的相關(guān)性研究
　　2.1AR基因（CAG）n重復(fù)次數(shù)的整體分布:AR-CAG重復(fù)次數(shù)在PCOS組為11-33，主要分布在22、23、21；在對(duì)照組

9、為13-30，主要分布在22、21、23，兩組均以22居多，兩組均以22為界，按AR基因所含CAG重復(fù)次數(shù)，將其分為短組CAG(n≤22)與長組CAG(n＞22)，兩組基因重復(fù)次數(shù)相似，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2.2短組與長組AR基因CAG重復(fù)在PCOS患者高雄激素組與雄激素水平正常組的分布中短組患者例數(shù)高于長組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。短組與長組AR基因CAG在PCOS患者胰島素抵抗組和非胰島素抵抗組的分布無差異。
　　3.SHBG

10、基因（TAAAA）n重復(fù)次數(shù)與多囊卵巢綜合征的相關(guān)性研究
　　3.1SHBG基因（TAAAA）n重復(fù)次數(shù)的整體分布:共有6、7、8、9次重復(fù)4個(gè)等位基因,未檢測到10次及11次重復(fù)。檢測到6/6、6/7、6/8、6/9、6/11、7/7、7/8、7/9、7/10、8/8、8/9、8/10、9/9、9/10共14種基因型,未見6/10、10/10、7/11、8/11、9/11、10/11、11/11基因型。整個(gè)群體中,等位基因頻率9

11、＞6＞7＞8,各等位基因分布沒有明顯差異。
　　3.2PCOS患者與對(duì)照組SHBG基因等位基因頻率、總基因型分布構(gòu)成,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。PCOS患者胰島素抵抗組與胰島素非抵抗基因型分布的比較布總構(gòu)成比差異無意義，9／9基因型在胰島素抵抗組中高于胰島素非抵抗組，兩組有差異。
　　4.指長比與多囊卵巢綜合癥相關(guān)性研究
　　4.1對(duì)照組與PCOS患者組左手指長比均無差異，而右手PCOS組指長比均大于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

12、，以2D：4D、2D：5D差異更為顯著。
　　4.2PCOS患者AR基因第一外顯子(CAG)n短組與長組左右手指長比2D：5D、3D：5D差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，短組小于長組，其余左手指指長比均未顯示出差異。右手AR基因第一外顯子(CAG)n短組與長組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：(1)寧夏漢族PCOS患者具有高雄激素血癥、肥胖、胰島素抵抗的內(nèi)分泌代謝特征，且高雄激素血癥和高胰島素血癥可以相互影響；(2)多囊卵巢綜合征患者存在

13、脂質(zhì)代謝紊亂，其血脂異常主要表現(xiàn)為TG水平升高；(3)寧夏漢族婦女PCOS患者AR-CAG重復(fù)次數(shù)與睪酮水平呈正相關(guān)，即CAG重復(fù)次數(shù)越短，AR活性越高，睪酮水平越低；同時(shí)較短的CAG重復(fù)次數(shù)和較高的雄激素水平可影響PCOS患者的高雄表現(xiàn)，兩者具有疊加作用；(4)AR-CAG多態(tài)性與高胰島素血癥之間無直接相關(guān)性，可能是通過高雄激素血癥間接影響了高胰島素血癥的發(fā)生；(5)寧夏漢族婦女SHBG基因啟動(dòng)子(TAAAA)n重復(fù)多態(tài)等位基因、基因

14、型及其數(shù)目與國外報(bào)道不同。9/9基因型(TAAAA)n重復(fù)多態(tài)可能與PCOS及胰島素抵抗有關(guān)；(6)SHBG基因啟動(dòng)子(TAAAA)n多態(tài)性并不是一個(gè)造成寧夏漢族PCOS患者發(fā)生糖代謝異常的重要的、敏感的遺傳因素和指標(biāo)。（7）寧夏漢族女性指長比，尤其是右手高的2D：4D和2D：5D可能是PCOS早期發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的重要參考指標(biāo)之一。而右手高的2D:3D可能是PCOS患者高胰島素抵抗的有價(jià)值的信息。（8）左手2D：5D、3D：5D與AR基因多態(tài)