羰-氨反應在老年色素形成中的共性表征及巰基化合物對其的清除.pdf

1、根據Yin and Brunk于1995年提出的羰基毒化衰老學說，羰基反應所導致的生物大分子交聯過程是積累性衰老損變的核心過程甚至衰老的本質。在體內，由自由基氧化和非酶糖基化等多種生化副反應所產生的不飽和醛酮類物質與體內各種物質的氨基結合，并進一步重排，形成難解難溶的老年色素類色素基團或熒光物質。本文討論了衰老的自由基學說、糖基化學說以及在其基礎上根據老年色素的形成機制發(fā)展而成的羰基毒化衰老學說。由于羰氨交聯反應是各種老年色素形成的核心

2、生化機制，因此我們探討了體內不同組織內產生的人造老年色素的熒光共性。在此基礎之上，通過對多種老年色素生成體系的研究進一步尋找去除老年色素的方法，并初步解釋了其發(fā)生機制。 本學位論文主要從羰基應激產物的共性和去除羰基應激產物兩個方面展開研究： 一、對來自大鼠不同組織的人造老年色素進行比較研究，并將其與MDA-BSA體系和MDA-DNA體系產生的老年色素進行對比。使用改進的熒光技術對來自大鼠肝臟、腦、心臟和腎臟組織的人造老年

3、色素進行了研究。組織樣品經過紫外照射后，在熒光顯微鏡不同激發(fā)塊下，都發(fā)出了相似的熒光。使用熒光分光光度計對其三維熒光地形圖進行檢測也發(fā)現了它們具有相似的老年色素類熒光峰。對相對簡單的體系，即MDA與小牛血清白蛋白(BSA)或DNA反應的體系，也進行了3D熒光的檢測。結果顯示，不同組織或生物大分子材料在加速了氧化/羰基應激的環(huán)境下具有相似的命運。 二、研究含巰基化合物對老年色素類熒光物質的清除作用。不飽和羰基類化合物來源于自由基對

4、脂類物質的攻擊或美拉德反應(糖基化)。這些小分子與體內氨基特別是蛋白質側鏈氨基發(fā)生交聯反應并進一步發(fā)生重排形成老年色素。我們檢測了一些巰基化合物后發(fā)現，它們能部分地降解老年色素類熒光物質，其中GSH效果最顯著。而且，在這一過程中沒有形成新的熒光峰。我們的結果顯示，老年色素有可能在溫和的條件下被降解。 綜上所述，通過對不同組織和生物材料的研究證明，各種老年色素的生成可能遵循相似的生化途徑并具有類似的發(fā)光基團，這為我們通過較為簡單的