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文檔簡介
1、目的:確定人類血栓反應(yīng)素hPWTSR的生物學(xué)功能和功能機(jī)制,探討hPWTSR在結(jié)腸癌發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制及作為臨床診斷和干預(yù)位點的應(yīng)用價值。 方法:通過EGFP-hPWTSR融合蛋白的亞細(xì)胞定位研究,探討該蛋白在細(xì)胞內(nèi)的分布及發(fā)揮作用的部位與形式;在結(jié)腸癌細(xì)胞系HT-29和LoVo,通過觀察pcDNA-hPWTSR融合蛋白過表達(dá)對細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞黏附與細(xì)胞侵襲能力等特性的影響,揭示hPWTSR在結(jié)腸癌發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制
2、;利用RT-PCR技術(shù),檢測結(jié)腸癌細(xì)胞系和病理組織樣本中hPWTSR的表達(dá)情況,評估hPWTSR作為結(jié)腸癌診斷標(biāo)志物和治療靶標(biāo)的臨床應(yīng)用價值。 結(jié)果:熒光定位研究顯示,EGFP-hPWTSR融合蛋白主要在細(xì)胞膜表達(dá),呈彌散點狀分布。基于兩株結(jié)腸癌細(xì)胞的研究發(fā)現(xiàn),pcDNA-hPWTSR融合蛋白過表達(dá)對腫瘤細(xì)胞生長周期沒有明顯影響,不影響低惡性的結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞凋亡過程,但其誘導(dǎo)高惡性的LoVo細(xì)胞凋亡;hPWTSR過表達(dá)增強(qiáng)
3、腫瘤細(xì)胞粘附性,降低腫瘤細(xì)胞的侵襲力,對腫瘤細(xì)胞移行有一定抑制作用。表達(dá)譜分析發(fā)現(xiàn),hPWTSR在結(jié)腸癌組織中表達(dá)水平下降,有腸外組織轉(zhuǎn)移病例的表達(dá)水平明顯低于未轉(zhuǎn)移者;在高轉(zhuǎn)移能力的結(jié)腸癌LoVo細(xì)胞株hPWTSR表達(dá)水平顯著低于低轉(zhuǎn)移能力的HT-29細(xì)胞株。 結(jié)論:hPWTSR作為一個細(xì)胞表面蛋白,參與細(xì)胞黏附與運(yùn)動等生物過程。hPWTSR促進(jìn)惡性腫瘤細(xì)胞凋亡,抑制腫瘤生長;降低腫瘤細(xì)胞的遷移能力,抑制腫瘤轉(zhuǎn)移。hPWTSR
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