雌激素-氟維司群影響乳腺癌細胞粘附及G蛋白偶聯(lián)受體30-鈣蛋白酶通路的介導作用.pdf

1、《中國圖書資料分類法》分類號：R966 單位代碼：10660 學 號：S110065 貴陽醫(yī)學院 貴陽醫(yī)學院 2014 屆碩士學位論文 屆碩士學位論文 雌激素 雌激素/氟維司群影響乳腺癌細胞粘附及 氟維司群影響乳腺癌細胞粘附及 G蛋白偶聯(lián)受體 蛋白偶聯(lián)受體 30 30-鈣蛋白酶通路的介導作用 鈣蛋白酶通路的介導作用 研 究 生：李 錚 導 師： 王旭東 王旭東 教授 教授 宛 蕾 教授 教授 年

2、 級： 2011 級 專 業(yè)： 藥理學 藥理學 2014 年 5 月 10 日雌激素 雌激素/氟維司群影響乳腺癌細胞粘附及 氟維司群影響乳腺癌細胞粘附及 G蛋白偶聯(lián)受體 蛋白偶聯(lián)受體 30 30-鈣蛋白酶通路的介導作用 鈣蛋白酶通路的介導作用 研究生：李 錚 導 師：王旭東 教授 宛 蕾 教授 專 業(yè)：藥理學 摘要 摘要 研究背景及目的：純抗雌激素藥物 研究背景及目的：純抗雌激素藥物氟維司群（ICI 182780,

3、 ICI）被用于治療激素敏感性乳腺癌病人，可以與雌激素受體競爭性結(jié)合，親和力與雌二醇相似；還可阻滯受體，抑制雌激素的結(jié)合，并激發(fā)受體發(fā)生形態(tài)改變，降低 ER 濃度而損害腫瘤細胞；可下調(diào)人體乳腺癌細胞中的 ER 蛋白，將 ER 下調(diào)在腫瘤細胞內(nèi)，使腫瘤的生長最小化。然而內(nèi)分泌療法經(jīng)常出現(xiàn)固有或獲得性耐藥現(xiàn)象，尤其是癌癥復發(fā)和轉(zhuǎn)移，但其信號機制尚不明了。本研究旨在探討 E2 和 ICI 是否增強細胞粘附及 GPR30-ERK1/2-calp

4、ain 信號通路在其中的介導作用，力圖為探尋基于 GPR30 信號通路的乳腺癌治療手段以減少轉(zhuǎn)移及提高抗雌激素治療的療效。 方法： 方法：采用雌激素受體（ERα）/G 蛋白偶聯(lián)受體 30（GPR30）陽性乳腺腫瘤細胞 MCF-7 為模型系統(tǒng)，ER 陰性/GPR30 陽性的 SK-BR-3 細胞作為對照。常規(guī)細胞培養(yǎng)，以 E2、ICI 或 G1 刺激模型細胞，通過蛋白印跡法觀察蛋白質(zhì)分子量變化；采用 GPR30 抑制劑 G15 或 CAN

5、P 抑制劑 ALLN、Calpeptin 預處理細胞，或 siRNA 轉(zhuǎn)染沉默 GPR30 表達，觀察 GPR30、CANP 在 E2 和 ICI 增強細胞粘附中的潛在作用。 結(jié)果： 結(jié)果：（1）E2 和 ICI 通過激活鈣蛋白酶促進 MCF-7 細胞與基質(zhì)膠的粘附。我們使用了乳腺癌細胞系 SK-BR-3（ERα-/GPR30+）作為對照。在 E2 或 ICI 的刺激下 MCF-7 細胞 calpain 1 發(fā)生自身水解且細胞粘附能力增