雌激素-氟維司群影響乳腺癌細(xì)胞粘附及G蛋白偶聯(lián)受體30-鈣蛋白酶通路的介導(dǎo)作用.pdf

1、《中國(guó)圖書資料分類法》分類號(hào)：R966 單位代碼：10660 學(xué) 號(hào)：S110065 貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院 貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院 2014 屆碩士學(xué)位論文 屆碩士學(xué)位論文 雌激素 雌激素/氟維司群影響乳腺癌細(xì)胞粘附及 氟維司群影響乳腺癌細(xì)胞粘附及 G蛋白偶聯(lián)受體 蛋白偶聯(lián)受體 30 30-鈣蛋白酶通路的介導(dǎo)作用 鈣蛋白酶通路的介導(dǎo)作用 研 究 生：李 錚 導(dǎo) 師： 王旭東 王旭東 教授 教授 宛 蕾 教授 教授 年

2、 級(jí)： 2011 級(jí) 專 業(yè)： 藥理學(xué) 藥理學(xué) 2014 年 5 月 10 日雌激素 雌激素/氟維司群影響乳腺癌細(xì)胞粘附及 氟維司群影響乳腺癌細(xì)胞粘附及 G蛋白偶聯(lián)受體 蛋白偶聯(lián)受體 30 30-鈣蛋白酶通路的介導(dǎo)作用 鈣蛋白酶通路的介導(dǎo)作用 研究生：李 錚 導(dǎo) 師：王旭東 教授 宛 蕾 教授 專 業(yè)：藥理學(xué) 摘要 摘要 研究背景及目的：純抗雌激素藥物 研究背景及目的：純抗雌激素藥物氟維司群（ICI 182780,

3、 ICI）被用于治療激素敏感性乳腺癌病人，可以與雌激素受體競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，親和力與雌二醇相似；還可阻滯受體，抑制雌激素的結(jié)合，并激發(fā)受體發(fā)生形態(tài)改變，降低 ER 濃度而損害腫瘤細(xì)胞；可下調(diào)人體乳腺癌細(xì)胞中的 ER 蛋白，將 ER 下調(diào)在腫瘤細(xì)胞內(nèi)，使腫瘤的生長(zhǎng)最小化。然而內(nèi)分泌療法經(jīng)常出現(xiàn)固有或獲得性耐藥現(xiàn)象，尤其是癌癥復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，但其信號(hào)機(jī)制尚不明了。本研究旨在探討 E2 和 ICI 是否增強(qiáng)細(xì)胞粘附及 GPR30-ERK1/2-calp

4、ain 信號(hào)通路在其中的介導(dǎo)作用，力圖為探尋基于 GPR30 信號(hào)通路的乳腺癌治療手段以減少轉(zhuǎn)移及提高抗雌激素治療的療效。 方法： 方法：采用雌激素受體（ERα）/G 蛋白偶聯(lián)受體 30（GPR30）陽(yáng)性乳腺腫瘤細(xì)胞 MCF-7 為模型系統(tǒng)，ER 陰性/GPR30 陽(yáng)性的 SK-BR-3 細(xì)胞作為對(duì)照。常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)，以 E2、ICI 或 G1 刺激模型細(xì)胞，通過(guò)蛋白印跡法觀察蛋白質(zhì)分子量變化；采用 GPR30 抑制劑 G15 或 CAN

5、P 抑制劑 ALLN、Calpeptin 預(yù)處理細(xì)胞，或 siRNA 轉(zhuǎn)染沉默 GPR30 表達(dá)，觀察 GPR30、CANP 在 E2 和 ICI 增強(qiáng)細(xì)胞粘附中的潛在作用。 結(jié)果： 結(jié)果：（1）E2 和 ICI 通過(guò)激活鈣蛋白酶促進(jìn) MCF-7 細(xì)胞與基質(zhì)膠的粘附。我們使用了乳腺癌細(xì)胞系 SK-BR-3（ERα-/GPR30+）作為對(duì)照。在 E2 或 ICI 的刺激下 MCF-7 細(xì)胞 calpain 1 發(fā)生自身水解且細(xì)胞粘附能力增