表皮生長(zhǎng)因子受體在缺血再灌注性心律失常和腎性高血壓中的作用及其機(jī)制.pdf

1、第一部分、表皮生長(zhǎng)因子受體在大鼠急性心肌缺血再灌注性心律失常中的作用及其機(jī)制
　　 目的：表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）屬于受體型酪氨酸激酶，對(duì)于胚胎期心臟的發(fā)育及維持成體心臟的功能方面都具有重要的意義。既往研究提示EGFR可能參與調(diào)控心肌細(xì)胞的電興奮性。本研究旨在觀察EGFR活化是否介導(dǎo)了大鼠急性心肌缺血再灌注性心律失常的發(fā)生，并初步探討其作用機(jī)制。
　　 方法：采用結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈左前降支法建立急性在體心肌缺血再灌注損

2、傷模型，監(jiān)測(cè)缺血再灌注過(guò)程中室性心律失常（室速、室顫等）的發(fā)生情況，檢測(cè)此過(guò)程中心肌EGFR蛋白及磷酸化水平、主要離子通道蛋白及其酪氨酸磷酸化水平的變化，并觀察EGFR表達(dá)下調(diào)后再灌注性心律失常的發(fā)生率。
　　 結(jié)果：①大鼠在體心肌缺血10min后再灌注性心律失常的發(fā)生率較高，以再灌注1~5min 最為明顯。②Western Blot 結(jié)果顯示，心肌EGFR的磷酸化水平在缺血期和再灌注早期升高。③EGFR siRNA心肌轉(zhuǎn)染下調(diào)

3、EGFR mRNA和蛋白表達(dá)的同時(shí)減少了再灌注誘導(dǎo)的室顫的發(fā)生率。④免疫沉淀及Western Blot 結(jié)果顯示，缺血再灌注過(guò)程中心肌鉀通道蛋白Kir2.1和Kv4.2的酪氨酸磷酸化水平無(wú)明顯變化，而鈉通道蛋白（NaV1.5）和L 型鈣通道蛋白（Cav1.2a）的酪氨酸磷酸化水平在缺血和再灌注早期顯著升高，其變化趨勢(shì)與磷酸化EGFR 水平較為一致；EGFR特異性抑制劑AG556 預(yù)處理能拮抗上述兩種通道磷酸化水平的升高。⑤AG556 預(yù)

4、處理可顯著降低再灌注性心律失常的發(fā)生率和嚴(yán)重程度，改善血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)。
　　 結(jié)論：EGFR在心肌缺血再灌注性心律失常的發(fā)生中起著重要的作用，其機(jī)制可能與促進(jìn)心肌鈉通道和L 型鈣通道蛋白的酪氨酸磷酸化有關(guān)。
　　 第二部分、表皮生長(zhǎng)因子受體在腎性高血壓大鼠心血管重構(gòu)中的作用及其機(jī)制
　　 目的：高血壓心血管重構(gòu)是導(dǎo)致高血壓急性心血管事件的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）是一種受體型酪氨酸激酶，參與調(diào)節(jié)多

5、種重要的細(xì)胞功能。既往研究表明EGFR在促進(jìn)心肌肥大、血管平滑肌細(xì)胞增殖中發(fā)揮了重要作用。本實(shí)驗(yàn)擬觀察EGFR是否參與了腎性高血壓心血管重構(gòu)，并初步探討其參與機(jī)制，為臨床防治腎性高血壓心血管重構(gòu)尋找合適的靶點(diǎn)。
　　 方法：本實(shí)驗(yàn)采用經(jīng)典的“兩腎一夾”（2K1C）Goldblatt 腎性高血壓大鼠模型，觀察血壓、左室重量指數(shù)、組織病理學(xué)變化，免疫組織化學(xué)和免疫印跡檢測(cè)血管和心肌EGFR的表達(dá)以及主要的下游信號(hào)分子細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激

6、酶（ERK）磷酸化水平的改變。
　　 結(jié)果：①術(shù)后2周2K1C 大鼠收縮壓急劇升高，術(shù)后3周趨于穩(wěn)定，至6周末實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)血壓維持在150 mmHg以上，表明2K1C 腎性高血壓大鼠模型建立成功。②高血壓大鼠左室重量指數(shù)明顯大于假手術(shù)組（P＜0.05），心肌Masson 染色顯示間質(zhì)及血管周?chē)哪z原增生明顯。③高血壓大鼠胸主動(dòng)脈免疫組化和心肌Western Blot 結(jié)果均顯示，EGFR表達(dá)增強(qiáng)并伴ERK的磷酸化水平升高，與高血壓