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1、目的:觀察低濃度的氮酮對(duì)體外培養(yǎng)的人眼小梁細(xì)胞增殖活性,超微結(jié)構(gòu)和吞噬功能的影響,尋找氮酮用于眼部的安全濃度。方法:進(jìn)行人眼小梁細(xì)胞的體外培養(yǎng),選擇第3-6代小梁細(xì)胞作為研究對(duì)象。濃度分別為10-3、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8g.l-1的氮酮分別作用于培養(yǎng)的人小梁細(xì)胞,采用倒置相差顯微鏡和透射電鏡從形態(tài)學(xué)觀察作用12h的藥物對(duì)小梁細(xì)胞影響;采用四唑鹽比色法(MTT)及熒光染色法觀察藥物作用6h,12h,24h對(duì)小梁
2、細(xì)胞增殖活性的影響;結(jié)合上述結(jié)果選擇氮酮濃度,乳膠微粒法測(cè)定對(duì)小梁細(xì)胞吞噬功能的影響。 結(jié)果:1.觀察細(xì)胞形態(tài)顯示10-6-10-8g.l-1氮酮對(duì)人小梁細(xì)胞形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)無(wú)明顯影響。高于該濃度的氮酮對(duì)小梁細(xì)胞形態(tài)均有不同程度的損傷,以變性為主,表現(xiàn)為細(xì)胞器的腫脹。2.MTT法示10-4-10-8g.l-1的氮酮作用6h,12h不影響小梁細(xì)胞的增殖,作用24h反而能促進(jìn)小梁細(xì)胞的增殖,其統(tǒng)計(jì)學(xué)差異有顯著意義(p<0.01)。3.
3、熒光染色法顯示10-3g.l-1和10-4g.l-1氮酮作用后的細(xì)胞呈不同程度變性壞死,該濃度的氮酮對(duì)小梁細(xì)胞有損傷,而10-6-10-8g.l-1氮酮未見(jiàn)明顯變性壞死損傷改變。4.乳膠微粒法測(cè)定10-6-10-8g.l-1氮酮能促進(jìn)人小梁細(xì)胞的吞噬功能,其統(tǒng)計(jì)學(xué)差異有顯著意義(p<0.01)。 結(jié)論:濃度在10-6g.l-1以下的氮酮不會(huì)導(dǎo)致小梁細(xì)胞活性的降低和形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變,10-6-10-8g.l-1濃度下的氮酮還能促進(jìn)人
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