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文檔簡介
1、目的:通過制作在病理及遠期行為學(xué)改變上與人類早產(chǎn)兒腦室周圍白質(zhì)軟化相似的動物模型研究米諾環(huán)素對缺氧缺血性腦損傷的保護作用。 方法:168只P2 SD新生大鼠,體重6~9g,雌雄不拘,購自中山大學(xué)北校區(qū)實驗動物中心,隨機分成正常對照組(36只),假手術(shù)組(36只)、HIBD組(48只)、HIBD+MN組(48只)。動物模型的制作在中山大學(xué)北校區(qū)動物實驗中心手術(shù)室制作,術(shù)后在標準環(huán)境下飼養(yǎng);HIBD+MN組HI后腹腔注射45mg/k
2、g米諾環(huán)素in PBS PH7.4,此后2天每24小時腹腔注射一次,共3次。假手術(shù)組及HIBD組在相同時間腹腔注射等量PBSPH7.4,共3次;HI后3d、1W、2W、4W時,各組大鼠分別麻醉后予4℃生理鹽水及4%多聚甲醛心臟灌注,腦組織于4%多聚甲醛中后固定,觀察腦形態(tài)學(xué)改變,腦組織石蠟切片行HE染色,病理評分。觀察缺氧缺血前后動物行為改變。 結(jié)果:HIBD組可見白質(zhì)水腫、結(jié)構(gòu)疏松、左側(cè)紋狀體梗死灶形成、病灶內(nèi)膠質(zhì)細胞浸潤,丘
3、腦及海馬可見細胞凋亡,HIBD+MN組病變較輕,未見梗死灶。P5病理評分:HIBD組與正常組、假手術(shù)組、HIBD+MN組差別有統(tǒng)計學(xué)意義(5.75±2.44 vs1.17±1.17,0.67±0.82,1.63±1.19,p<0.01)。P9病理評分:HIBD組與正常組、假手術(shù)組、HIBD+MN組差別有統(tǒng)計學(xué)意義(7.00±3.42 vs1.67±0.52,1.67±1.63,4.13±1.13,p<0.05),HIBD+MN組與正常組
4、、假手術(shù)組差異有統(tǒng)計學(xué)意義,均為p=0.04。P16病理評分:HIBD組與正常組、假手術(shù)組、HIBD+MN組差別有統(tǒng)計學(xué)意義(8.38±1.92 vs1.67±1.33,1.33±1.21,2.38±2.13,p<0.01) P30病理評分:HIBD組與正常組、假手術(shù)組、HIBD+MN組差別有統(tǒng)計學(xué)意義(9.88±0.99 vs0.50±0.84,0.67±0.82,1.50±1.20,p<0.01) HIBD組評分均高于其他組,且呈上
5、升趨勢,HIBD+MN HI1W后與正常組、假手術(shù)組差別無統(tǒng)計學(xué)意義。HI后4W行為學(xué)測定結(jié)果如下:①斜坡試驗中HIBD組動物由頭向下轉(zhuǎn)為頭向上超過135°所需的時間最長,HIBD組與正常組、假手術(shù)組、HIBD+MN組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(8.71±6.43 vs1.61±0.61,2.00±0.82,2.25±0.83,p<0.05)正常組與假手術(shù)組、HIBD+MN組間差別無統(tǒng)計學(xué)意義。②懸吊試驗中,HIBD組與正常組、假手術(shù)組、HIBD
6、+MN組差別有統(tǒng)計學(xué)意義(3.38±1.86 vs35.17±14.60,29.89±16.80,22.42±19.85,p<0.05)正常組與假手術(shù)組、HIBD+MN組差別無統(tǒng)計學(xué)意義。③Cylinder試驗中,HIBD組左、右上肢感覺運動不對稱,左側(cè)上肢觸壁次數(shù)百分比HIBD組與正常組、假手術(shù)組、HIBD+MN組差別有統(tǒng)計學(xué)意義(13.31±17.35 vs41.56±3.47,32.46±8.19,31.79±11.11,p<0.
7、05)④曠場試驗中,HIBD組與HIBD+MN組分數(shù)均落后于正常組、假手術(shù)組,且兩組間差別無統(tǒng)計學(xué)意義,HIBD組與正常組、假手術(shù)組間差別有統(tǒng)計學(xué)意義(4.25±2.14 vs11.89±2.39,10.00±3.48,p<0.01),HIBD+MN組與正常組、假手術(shù)組差別有統(tǒng)計學(xué)意義(4.63±2.28 vs11.89±2.39,10.00±3.48,p<0.05)。 結(jié)論:⑴對新生2天大鼠作單側(cè)頸總動脈結(jié)扎加低氧(8%O2+
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