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文檔簡介
1、目的:觀察中藥葛根素(purarin)對小鼠D3胚胎干細胞(embryonic stem cell-D3)肝細胞定向分化能力的影響及其機制。
方 法:MTT法檢測不同濃度的葛根素對小鼠胚胎干細胞能力的影響,篩選合適的濃度用于分化誘導。通過流式細胞計數法對干細胞分化的肝細胞進行計數和RT-PCR技術觀察肝細胞標志物表達量,研究葛根素對干細胞的肝細胞定向分化能力的影響。并應用RT-PCR技術觀察轉錄因子BMP4/BMP2的表達
2、量研究葛根素影響胚胎干細胞的肝細胞定向分化能力的機制。
結 果:小鼠D3胚胎干細胞可分化為平滑肌細胞、心肌細胞、血管內皮細胞和肝細胞等多種細胞類型。MTT結果顯示,葛根素顯著促進mES-D3細胞的能力。最低有效濃度為0.1μM,最大有效濃度為10μM。100μM的葛根素顯著提高甲胎蛋白和白蛋白陽性的細胞數,并且甲胎蛋白和白蛋白在mRNA的表達水平均升高。100μM葛根素將小鼠胚胎干細胞分化過程中BMP4和BMP2表達高峰由
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