洛伐他汀對(duì)醛固酮誘導(dǎo)新生大鼠心室成纖維細(xì)胞增殖及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的研究.pdf

1、本研究旨在通過觀察HMG-CoA還原酶抑制劑洛伐他汀(10vastatin,Lov)對(duì)ALD誘導(dǎo)的大鼠CFs增殖和iNOS-NO系統(tǒng)活性的影響,從轉(zhuǎn)錄、翻譯水平了解其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和分子生物學(xué)機(jī)制,初步探討Lov與ALD致心肌間質(zhì)纖維化的關(guān)系,為闡明心肌纖維化的發(fā)生機(jī)制,防治心肌纖維化提供新的思路和實(shí)驗(yàn)依據(jù).實(shí)驗(yàn)內(nèi)容主要包括以下五部分:第一部分:新生大鼠心肌成纖維細(xì)胞的原代培養(yǎng)及鑒定.結(jié)論:采用胰酶消化、差速貼壁法成功原代培養(yǎng)出新生大鼠CFs

2、;經(jīng)倒置顯微鏡、透射電鏡和免疫細(xì)胞化學(xué)染色證實(shí)本實(shí)驗(yàn)所培養(yǎng)的細(xì)胞確為CFs,且純度達(dá)98%.第二部分:洛伐他汀對(duì)醛固酮誘導(dǎo)新生大鼠心室成纖維細(xì)胞增殖和c-fos基因表達(dá)的影響.結(jié)論:ALD通過MR受體劑量依賴性促進(jìn)CFs增殖.在一定濃度范圍內(nèi),Lov可劑量和時(shí)間依賴性抑制醛固酮誘導(dǎo)的CFs的DNA合成和細(xì)胞數(shù)目增加,抑制CFs增殖,使細(xì)胞滯留于G<,0>/G<,1>期,并下調(diào)CFs c-fos mRNA的表達(dá),該作用可被MVA和FPP逆

3、轉(zhuǎn),其機(jī)制可能與通過MVA代謝途徑阻斷c-fos mRNA的表達(dá)有關(guān).第三部分:洛伐他汀對(duì)醛固酮誘導(dǎo)新生大鼠心肌成纖維細(xì)胞N0合成的調(diào)控作用及其分子機(jī)制的研究.結(jié)論:ALD劑量依賴性通過MR受體下調(diào)CFs的iNOS-NO系統(tǒng)活性,與ALD促CFs增殖作用密切相關(guān);Lov劑量依賴性上調(diào)CFs的iNOS-NO系統(tǒng)活性,拮抗ALD的作用,與Lov抑制ALD誘導(dǎo)的CFs增殖作用密切相關(guān),MVA途徑參與此作用.Lov和ALD可能通過調(diào)控CFs的i

4、NOS-NO系統(tǒng)活性而作用于CFs增殖.第四部分:Ras-MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)在洛伐他汀抑制醛固酮誘導(dǎo)心室成纖維細(xì)胞增殖中的作用.結(jié)論:ALD能激活新生大鼠CFs的MAPK活化,活化的MAPK從細(xì)胞漿轉(zhuǎn)位進(jìn)入細(xì)胞核導(dǎo)致CFs增殖;Lov能下調(diào)ALD誘導(dǎo)的CFs的MAPK活化水平,其作用可被MVA和FPP逆轉(zhuǎn);Lov能夠抑制ALD誘導(dǎo)的活化MAPK從細(xì)胞漿轉(zhuǎn)位進(jìn)入細(xì)胞核,從而抑制CFs增殖.第五部分:洛伐他汀對(duì)ALD誘導(dǎo)新生大鼠心室成纖維