MITA抑制乙型肝炎病毒復(fù)制作用的初步研究.pdf

1、目的:已有文獻(xiàn)報道,MITA在識別DNA通路中有著重要的作用,可以誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生有效的抗病毒應(yīng)答。HBV屬于嗜肝病毒科,為雙鏈DNA病毒。MITA是否能在肝臟細(xì)胞誘導(dǎo)抗病毒的天然免疫反應(yīng),從而起到抑制HBV復(fù)制的作用,是本論文要回答的主要問題。
　　方法:本文采用熒光素酶和Realtime RT-PCR的檢測方法,檢測Huh7細(xì)胞中MITA過表達(dá)對IFN信號通路中信號分子的影響;使用Southern blot、Realtime PC

2、R和ELISA檢測MITA過表達(dá)以及敲除對HBV復(fù)制的影響。
　　結(jié)果:Huh7細(xì)胞中,MITA過表達(dá)可以增強(qiáng)IFN-β啟動子,IRF3、和ISRE的報告基因表達(dá)且具有劑量依賴性,但不影響NF-кB的基因表達(dá);在mRNA的水平,MITA過表達(dá)可以誘導(dǎo)IFIT1、MxA和ISG15等ISGs基因的表達(dá)。在Huh7細(xì)胞中,MITA過表達(dá)可以抑制HBV的復(fù)制;siMITA沉默時,HBV復(fù)制增加。在Huh7細(xì)胞中,HBV表達(dá)劑量增加對MI