樺褐孔菌多糖對感染不同毒株弓形蟲小白鼠AP-1部分信號因子的影響研究.pdf

1、為了探討樺褐孔菌多糖對感染不同毒株弓形蟲小白鼠的早期作用機(jī)制及對AP-1部分信號因子的影響。本試驗(yàn)通過建立感染不同毒株弓形蟲小白鼠模型后，隨機(jī)將其分成3組：陰性組；感染不同毒株弓形蟲小白鼠模型組；樺褐孔菌多糖試驗(yàn)組。采用ELISA方法檢測細(xì)胞因子IL-12、IL-6、IL-1β、TNF-α的表達(dá)；RT-PCR法檢測肝組織中c-Jun及脾組織中IL-1β和IL-12的mRNA表達(dá)；Western blot法檢測核轉(zhuǎn)錄因子c-Jun蛋白的表

2、達(dá)。
　　ELISA結(jié)果顯示，感染RH株與感染PLK株的弓形蟲小白鼠血清中IL-12、IL-6、IL-1β、TNF-α的結(jié)果相比較，兩種毒株的模型組于感染后的值均呈現(xiàn)上升趨勢，分別在36h、48h、24h、24h達(dá)到峰值，而后呈現(xiàn)下降趨勢，但感染RH株的模型組表達(dá)量在12~60h比感染PLK株更高；兩種毒株的試驗(yàn)組于12~60h期間IL-12、IL-6、IL-1β、TNF-α的值均一直高于陰性組，低于模型組。結(jié)果表明：感染RH株弓

3、形蟲小白鼠與感染PLK株弓形蟲小白鼠相比較更能刺激其血清中IL-12、IL-6、IL-1β、TNF-α的過度表達(dá)，樺褐孔菌多糖均能調(diào)節(jié)感染不同毒株弓形蟲小白鼠IL-12、IL-6、IL-1β、TNF-α的表達(dá)。RT-PCR結(jié)果顯示，感染RH株、PLK株弓形蟲小白鼠脾組織中的IL-1β、IL-12和肝組織中c-Jun的陰性組、模型組、試驗(yàn)組分別在736bp、978bp和360bp處擴(kuò)增出單一電泳條帶，其中模型組條帶最亮，試驗(yàn)組次之，陰性組

4、最暗。IL-1βmRNA、IL-12 mRNA和c-Jun mRNA與內(nèi)參mRNA進(jìn)行灰度分析結(jié)果顯示，感染RH株與PLK株弓形蟲小白鼠脾組織中IL-1β、IL-12和肝組織中c-Jun的模型組與試驗(yàn)組比較差異極顯著(P<0.01)，試驗(yàn)組和模型組與陰性組比較均呈極顯著性差異(P<0.01)。但I(xiàn)L-12的RH株模型組與PLK株模型組比較差異不顯著(P>0.05)；IL-1β和c-Jun RH株模型組顯著性高于PLK株模型組(0.01<

5、P<0.05)。結(jié)果表明：感染RH株、PLK株弓形蟲小白鼠均能使脾組織中的IL-1β、IL-12和肝組織中的c-Jun大量表達(dá)，但I(xiàn)L-1β、c-Jun RH株與PLK株相比較表達(dá)程度更強(qiáng)。樺褐孔菌多糖能夠調(diào)節(jié)感染RH株、PLK株脾組織中的IL-1β、IL-12和肝組織中c-Jun的表達(dá)。SDS結(jié)果顯示，感染RH株與感染PLK株弓形蟲小白鼠肝臟中c-Jun（p39）蛋白的陰性組、模型組、試驗(yàn)組均在39KD處有與目的蛋白相一致的條帶，且模

6、型組條帶最亮，試驗(yàn)組次之，陰性組最暗。免疫印跡結(jié)果顯示RH株與PLK株相比較c-Jun蛋白模型組條帶更寬，顏色更深。灰度分析結(jié)果顯示RH株模型組與PLK株模型組相比較差異極顯著(P<0.01)。結(jié)果說明：樺褐孔菌多糖均能調(diào)節(jié)感染RH株、PLK株弓形蟲小白鼠肝組織中c-Jun蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)論：樺褐孔菌多糖能夠調(diào)節(jié)感染不同毒株弓形蟲小白鼠血清中IL-12、IL-6、IL-1β、TNF-α的表達(dá)。樺褐孔菌多糖能夠調(diào)節(jié)感染不同毒株弓