STR-PCR在唐氏綜合征診斷中的應(yīng)用.pdf

1、目的： 唐氏綜合征(Downsyndrome，DS)又稱21三體綜合征，是一種最常見的先天性染色體數(shù)目畸變，發(fā)病率高達(dá)0.13％，給家庭和社會帶來沉重的負(fù)擔(dān)。目前臨床應(yīng)用的染色體核型分析方法因檢測周期長、技術(shù)難度大、成本高，不適合在普通實(shí)驗(yàn)室開展，不能應(yīng)用于大規(guī)模的臨床篩查，故迫切需要一種快速、準(zhǔn)確的方法對唐氏綜合征患者進(jìn)行快速診斷，為產(chǎn)前基因診斷、降低患兒出生率奠定基礎(chǔ)。 方法： 選擇21號染色體上唐氏綜合征關(guān)

2、鍵區(qū)域(DSCR)內(nèi)部及附近的8個(gè)具有高雜合度的短串聯(lián)重復(fù)序列(D21S1411、D21S1413、D21S1414、D21S1432、D21S1437、D21S1446、D21S1270、D21S2054)，結(jié)合聚合酶鏈反應(yīng)，以及單鏈構(gòu)象多態(tài)性進(jìn)行分析。從97個(gè)可疑染色體疾病的無關(guān)個(gè)體采集外周抗凝血，經(jīng)鹽析法提取基因組DNA，擴(kuò)增上述8個(gè)基因座，通過聚丙烯酰胺凝膠、銀染，所有凝膠均經(jīng)凝膠成像系統(tǒng)分析。同時(shí)，所有標(biāo)本均進(jìn)行染色體核型分析

3、。 結(jié)果： 1、不同個(gè)體在某一STR基因座的電泳結(jié)果可出現(xiàn)以下4種情況之一：①、只出現(xiàn)一條DNA深帶，為一純合子；②、出現(xiàn)兩條DNA帶，密度比接近1:1，為正常雜合子；③、出現(xiàn)兩條DNA帶，密度比接近2:1，為可疑唐氏綜合征患者；④、出現(xiàn)三條DNA帶，密度比接近1:1:1，可確診為唐氏綜合征患者。 2、97例患者中經(jīng)STR-PCR分析，40例確診為唐氏綜合征，與染色體核型分析結(jié)果一致。 3、經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，8

4、個(gè)STR基因座的雜合度均在75％以上，多態(tài)信息量均在50％以上。 結(jié)論： 1、本研究選用的21號染色體上的8個(gè)STR基因座，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，符合Hardy-Weinberg平衡定律，具有高度的多態(tài)性，可作為良好的遺傳標(biāo)記，8個(gè)基因座均可見典型三體帶型。 2、用STR-PCR技術(shù)檢測21號染色體上的8個(gè)STR基因座的等位基因來診斷經(jīng)典型和易位型唐氏綜合征患者，本研究中與核型分析相比，準(zhǔn)確性達(dá)100％。該方法對于診斷比