不同頻率間歇低氧誘發(fā)大鼠高血壓機制的研究及抗氧化劑Tempol干預效果分析.pdf

1、研究目的：
　　阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征(ObsructiveSleepApneaSyndrome，OSAS)是常見的睡眠障礙疾病，其損傷的核心因素是缺氧.再氧合形成的慢性間歇低氧。大量流行病學研究表明，OSAS與高血壓密切相關。然而，OSAS合并高血壓的發(fā)病機制至今仍不清楚。血管內(nèi)皮功能障礙與交感神經(jīng)興奮性增強這兩種機制可能參與其中。同時，OSAS是一種氧化應激性疾病。因此，是否OSAS可能通過介導機體氧化應激反應，產(chǎn)生大量RO

2、S，導致血管內(nèi)皮功能障礙和交感神經(jīng)異常興奮，最終引起高血壓的發(fā)生，這需要進一步的研究。另外，以往研究多為低氧時間及程度對血壓的影響，少有不同低氧頻率下血壓的變化研究。鑒于此我們設計了本實驗，通過在不同頻率的間歇低氧條件下測定大鼠血清血管活性物質和兒茶酚胺的含量變化，以此反映血管內(nèi)皮功能與交感神經(jīng)興奮性，以及高血壓的發(fā)病情況，探討CIH相關性高血壓發(fā)生的可能作用機制，觀察不同時段給予抗氧化劑Tempol干預效果，為臨床預防和治療OSAS相

3、關性高血壓提供實驗數(shù)據(jù)支持。
　　研究內(nèi)容：
　　1.不同頻率慢性間歇低氧條件下大鼠血管內(nèi)皮功能及交感神經(jīng)興奮性的研究
　　2.抗氧化劑Tempol對慢性間歇低氧條件下大鼠血管內(nèi)皮功能及交感神經(jīng)興奮性的干預作用
　　實驗方法：
　　實驗分為兩部分，第一部分利用計算機控制裝置改變輸送進大鼠飼養(yǎng)箱內(nèi)的氣體含量，制造氧濃度為5％，間歇低氧頻率分別為10次/小時，20次/小時，30次/小時，40次/小時的間歇低氧環(huán)

4、境，建立大鼠不同頻率間歇低氧模型。Wistar雄性大鼠隨機分為5組，每組8只，包括個常氧對照組(NC組)和4組不同間歇低氧頻率組，即10次/h間歇低氧組(IH10組)、20次/h間歇低氧組(IH20組)、30次/h間歇低氧組(IH30組)、40次/h間歇低氧組(IH40組)。第二部分分組包括第一部分的常氧對照組(NC組)以及30次/h間歇低氧組(IH組)，同時增設30次/h間歇低氧條件下Tempol干預組及其對照組32只大鼠，每組8只，

5、共4組，即暴露開始當天Tempol腹腔注射干預組(IHT1組)與NS.對照組(IHN1組)，暴露開始后第29天Tempol干預組(IHT2組)與NS.對照組(IHN2組)。通過無創(chuàng)鼠尾套管法測定實驗前和每周實驗后大鼠動脈收縮壓(SBP)，實驗結束后測定各組大鼠血清一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素(ET-1)、內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)、去甲腎上腺素(NE)和腎上腺素(E)含量以及血清和腎上腺組織勻漿中丙二醛(MDA)含量。
　　實驗結

6、果：
　　第一部分：
　　1.各組大鼠實驗前SBP無統(tǒng)計學差異。隨著暴露時間延長，各IH組大鼠SBP逐漸升高，至6周時，各IH組SBP較NC組和實驗前自身水平均顯著升高(P<0.05或P<0.01)。不同頻率IH之間比較存在著有統(tǒng)計學差異(F=9.213，P<0.05)，SBP隨著頻率的增加而升高，但是當頻率達到40次/時，較IH30組沒有呈現(xiàn)進一步升高的趨勢。NC組SBP各時間段較實驗前自身比較無顯著變化。
　　2.

7、各實驗組血清ET-1(F=22.080，P<0.01)、NO(F=19.369，P<0.01)和eNOS(F=14.325，P<0.01)水平不同，均存在著統(tǒng)計學差異。各IH組較NC組血清ET-1水平顯著增高(P<0.05或P<0.01)，eNOS、NO水平顯著降低(均P<0.01)。隨著間歇低氧頻率的增加，ET-1水平逐漸升高，eNOS、NO水平逐漸減低。IH40組與IH30組相比，ET-1水平有升高趨勢，eNOS、NO水平有降低趨勢

8、，但各指標均無統(tǒng)計學意義。血清ET-1水平與第6周SBP呈顯著正相關(r=0.659，P=0.000)，NO水平與6周SBP呈負相關(r=-0.580，P=0.000)
　　3.各組之間血清NE(F=13.136，P<0.01)和E(F=20.877，P<0.01)含量均存在著統(tǒng)計學意義。各IH組NE和E含量較NC組比較明顯增加(P<0.05或P<0.01)。隨著低氧頻率的增加，NE和E的含量逐漸遞增。與IH30組相比，IH40組

9、有升高趨勢，但無統(tǒng)計學意義。血清NE、E水平與第6周SBP呈正相關(r=0.542，P=0.000；r=0.540，P=0.000)。
　　第二部分：
　　1.各組大鼠實驗前SBP無統(tǒng)計學差異。隨著實驗時間延長，IH組與2組NS干預組大鼠SBP逐漸升高(P<0.05或P<0.01)，兩兩比較無統(tǒng)計學意義。實驗暴露后第29天予以Tempol干預即IHT2組SBP明顯低于相應NS對照組(P<0.05)，但仍高于NC組(P<0.0

10、5)及實驗前水平(P<0.05)；實驗前予以Tempol干預組即IHT1組大鼠SBP沒有隨時間延長出現(xiàn)升高趨勢，與實驗前自身水平及NC組無統(tǒng)計學差異，SBP顯著低于IHT2組(P<0.01)。
　　2.各IH組之間血清ET-1(F=25.681，P<0.01)、NE(F=14.769，P<0.01)、E(F=28.017，P<0.01)、NO(F=19.28l，P<0.01)、eNOS(F=22.184，P<0.01)均存在著統(tǒng)計

11、學意義。Tempol干預組較相應NS對照組相比，ET-1和NE、E水平顯著降低(P<0.05或P<0.01)，NO、eNOS水平顯著升高(P<0.05或P<0.01)。其中，IHT1組與IHT2組相比，ET-1和NE、E水平下降更明顯(均P<0.01)，NO、eNOS水平更高(均P<0.01)，且與NC組無統(tǒng)計學意義。IHT2組ET-1、NE、E水平仍高于NC組(P<0.01)，NO、eNOS仍較其降低(均P<0.01)。IH組與IHN

12、1、IHN2組比較各指標無差異。
　　3.各IH組之間血清MDA(F=14.868，P<0.01)以及腎上腺組織中MDA(F=13.649，P<0.01)均存在著統(tǒng)計學意義。IH組與IHN1組、IHN2組相比較，各指標均沒有統(tǒng)計學差異。Tempol干預的2組IH組即IHT1組與IHT2組較相應NS對照組相比，血清及腎上腺組織MDA水平顯著降低(P<0.05或P<0.01)。其中，IHT1組較IHT2組下降更明顯(均P<0.01)，

13、與NC組比較均沒有統(tǒng)計學差異。IHT2組其水平均仍高于較NC組，存在著統(tǒng)計學意義(均P<0.01)。
　　結論：
　　1.慢性間歇低氧可以引起血壓的升高，提示長期CIH可能是OSAS并發(fā)高血壓的重要原因之一。在一定間歇低氧頻率內(nèi)，血壓升高的程度隨著頻率的增加而增加。
　　2.慢性間歇低氧可引起血管內(nèi)皮功能障礙和交感神經(jīng)興奮性增強，這可能是CIH相關性高血壓發(fā)生的兩條重要途徑。同樣，在一定的間歇低氧頻率內(nèi)，頻率越高，血管