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1、該文初步探討了原核表達(dá)的重組人內(nèi)抑素對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的影響及其部分細(xì)胞與分子機(jī)理.作者利用酶標(biāo)儀采用MTT法和倒置相差顯微鏡以及流式細(xì)胞儀檢測(cè)重組人內(nèi)抑素對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響.此外,采用熒光顯微鏡連結(jié)CCD-SPOT、電子顯微鏡、流式細(xì)胞儀及電泳分析觀察該制劑誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞ECV 304凋亡情況,并通過半胱天冬酶3(caspase3)活性分析,利用熒光指示劑Fura-2/AM通過熒光分光光度法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子和鎂離子濃度,全細(xì)胞膜片鉗觀察細(xì)胞跨
2、膜鉀電流的變化,免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)該細(xì)胞內(nèi)p53和Bcl-2基因的表達(dá)探討重組人內(nèi)抑素誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞ECV 304發(fā)生細(xì)胞凋亡的機(jī)制.該研究結(jié)果提示重組人內(nèi)抑素可以影響ECV 304細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)其發(fā)生程序性細(xì)胞死亡即細(xì)胞凋亡,后者的發(fā)生與大電導(dǎo)鈣依賴性鉀通道開放增加從而導(dǎo)致跨膜鉀電流增強(qiáng),細(xì)胞內(nèi)鈣離子和鎂離子發(fā)生超載、半胱天冬酶活性增強(qiáng)、和Bcl-2表達(dá)降低以及p53表達(dá)升高有關(guān).重組人內(nèi)抑素誘導(dǎo)的ECV 304細(xì)胞凋亡是上述因
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