葡萄籽原花青素對兔動脈粥樣硬化的預(yù)防干預(yù)及分子機理研究.pdf

1、目的:通過飼喂高膽固醇建立兔AS動物模型,觀察GSPE對AS的預(yù)防作用,并從以下幾方面探討其作用機制:(1)研究GSPE對血脂的影響;(2)通過觀察GSPE對氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)的影響,研究其抗脂質(zhì)過氧化作用;(3)通過觀察GSPE對C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein,CRP)、白細胞介素6(in

2、terleukin 6,IL-6)的影響,研究其抗內(nèi)皮炎癥作用;(4)通過觀察GSPE對細胞間黏附分子(jntercellularadhesion molecule,ICAM-1)、血管細胞黏附分子(vascular cell adhesionmolecuIe,VCAM-1)、E-選擇素的影響,研究其抗內(nèi)皮粘附作用.方法:1、建立AS動物模型并進行GSPE預(yù)防干預(yù)選購雄性新西蘭大白兔30只,分籠喂養(yǎng),飲水不限,飼料量為每只每天100~1

3、20g,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后進入實驗.將其隨機分為正常對照(A)、高脂模型(B)、GSPE預(yù)防干預(yù)(C)3組,每組1 0只,分別飼喂標準、標準+1％膽固醇、標準+1％膽固醇+1％GSPE的顆粒飼料.各組兔分別于實驗開始前1天及開始后第1、2、4、8周末,在清晨空腹稱重后,經(jīng)耳中動脈采血.于實驗的第12周末,各組兔全部在清晨空腹稱重后,經(jīng)耳中動脈采血后處死,留取主動脈、心、腦、腎組織進行形態(tài)學(xué)觀察和免疫組織化學(xué)檢查.2、血清學(xué)研究取上述3組兔

4、的空腹血清標本,應(yīng)用日立71 70型全自動生化分析儀測定其血清總膽固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白膽固醇(loWdensity lipoprotein cholesterol,LDL-C)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白膽固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)含量;應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附(enzyme linked immunosor

5、bent assay,ELISA)雙抗體夾心法測定血漿ox-LDL含量;應(yīng)用比色法測定血清MDA含量;應(yīng)用酶免疫測定(enzyme immunoassay,EIA)法測定CRP含量;應(yīng)用ELISA雙抗體夾心法測定IL-6、ICAM-1、VCAM-1、E-選擇素含量.3、病理學(xué)研究取上述3組兔的主動脈、心、腦、腎組織標本進行病理組織切片,應(yīng)用光鏡和透射電鏡觀察主動脈、心、腦、腎組織標本病理改變并拍照,并應(yīng)用CD68和α-actin免疫組織