PSD-95基因沉默對(duì)神經(jīng)病理性疼痛大鼠疼痛行為學(xué)的干預(yù)作用.pdf

1、目的：
　　 已有實(shí)驗(yàn)證明PSD-95與神經(jīng)病理性疼痛密切相關(guān)，而RNA干擾(RNAinterference，RNAi)技術(shù)是近年研究比較熱門的治療方向。本研究旨在利用RNAi技術(shù)沉默大鼠脊髓PSD-95基因，并觀察此方法治療神經(jīng)病理性疼痛的效果。
　　 方法：
　　 將30只雄性SD大鼠隨機(jī)分成6組(n＝5)，分別為空白對(duì)照，假手術(shù)組(3天和7天)，以及CCI模型(3天、7天、14天)組，通過(guò)測(cè)量機(jī)械性痛閾和熱

2、痛閾來(lái)判斷CCI模型是否成功。術(shù)后第3天、第7天、第14天分別處死大鼠，留取脊髓標(biāo)本，進(jìn)行real-timePCR分析PSD-95mRNA表達(dá)水平的變化。取不同重量大鼠建立鞘內(nèi)置管給藥模型，置管次日鞘內(nèi)注射2％利多卡因，判斷鞘內(nèi)置管是否成功，并評(píng)價(jià)不同重量大鼠置管深度與效果的關(guān)系。選取合適重量大鼠，分組后(n=6)進(jìn)行鞘內(nèi)置管，鞘內(nèi)給予PSD-95小干擾RNA(smallinterferingRNA，siRNA)，最后一次給藥后1天、3

3、天、5天分別測(cè)量痛行為變化，并于1天和5天處死動(dòng)物，留取脊髓標(biāo)本，進(jìn)行real-timePCR分析PSD-95siRNA表達(dá)的變化。選取合適重量大鼠，分組(n＝5)后進(jìn)行鞘內(nèi)置管，置管后3-4天建立坐左側(cè)骨神經(jīng)CCI(chronicconstrictioninjury，慢性壓迫性損傷)模型，并鞘內(nèi)分別給予PSD-95siRNA、生理鹽水、轉(zhuǎn)染試劑(i-FectTM)、陰性對(duì)照siRNA，在給藥后1天和5天分別測(cè)量痛閾，并處死動(dòng)物，留取脊

4、髓標(biāo)本，進(jìn)行real-timePCR分析PSD-95mRNA表達(dá)水平的變化。
　　 結(jié)果：
　　 大鼠CCI模型手術(shù)側(cè)后足機(jī)械性痛閾和熱痛敏閾值明顯下降(P<0.05)，但脊髓背角PSD-95mRNA表達(dá)無(wú)明顯變化。正常大鼠中，鞘內(nèi)注射PSD-95siRNA可降低大鼠脊髓背角PSD-95mRNA表達(dá)水平(P<0.05)，但對(duì)其痛閾無(wú)顯著影響。鞘內(nèi)注射PSD-95siRNA可明顯緩解CCI模型大鼠的神經(jīng)病理性疼痛(P<0.