慢性心理應(yīng)激與荷瘤小鼠海馬神經(jīng)元及免疫細(xì)胞凋亡損傷相關(guān)機(jī)制臨床前研究.pdf

1、目的：本研究主要觀察慢性心理應(yīng)激后小鼠大腦邊緣系統(tǒng)結(jié)構(gòu)之一海馬神經(jīng)元數(shù)目和細(xì)胞凋亡的變化：觀察慢性心理應(yīng)激后小鼠腎上腺皮質(zhì)的形態(tài)改變；觀察應(yīng)激對(duì)小鼠中樞免疫器官——胸腺、外周免疫器官——脾臟組織形態(tài)以及免疫細(xì)胞凋亡的影響；同時(shí)檢測應(yīng)激過程中小鼠種植腫瘤的生長情況和腫瘤細(xì)胞形態(tài)。初步探討慢性心理應(yīng)激小鼠內(nèi)分泌免疫功能和“情緒中樞”一海馬的變化，以期進(jìn)一步從分子水平揭示應(yīng)激影響大腦海馬功能的可能機(jī)制，同時(shí)闡述應(yīng)激影響機(jī)體免疫功能的可能機(jī)制；

2、在此基礎(chǔ)上探討慢性心理應(yīng)激影響腫瘤發(fā)生發(fā)展的相關(guān)機(jī)理。 方法：采用昆明小白鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，動(dòng)物隨機(jī)分為空白對(duì)照組(NC)、單純應(yīng)激組(SS)、單純腫瘤組(ST)、腫瘤加應(yīng)激組(S+T)。取腹腔傳代第7天的Sl80腫瘤細(xì)胞，接種子昆明小白鼠右側(cè)腋窩皮下。接種后實(shí)驗(yàn)應(yīng)激組予以束縛應(yīng)激，8小時(shí)／天木晚。應(yīng)激操作完成后處死小鼠，剝離腫瘤稱重并取待檢測部位。常規(guī)固定制作檢測部位HE片、免疫組化Caspase-3片；顯微鏡下觀察上述器官組織的

3、形態(tài)學(xué)變化，同時(shí)進(jìn)行相應(yīng)細(xì)胞記數(shù)并顯微拍照，所得數(shù)據(jù)輸入ssps11．5進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果：(1)應(yīng)激小鼠腎上腺皮質(zhì)明顯增厚，束狀帶細(xì)胞增生肥大并有脫顆粒，提示糖皮質(zhì)激素分泌增加，束縛應(yīng)激模型建立成功。(2)實(shí)驗(yàn)?zāi)㎞C組與ST組平均體重?zé)o顯著差異，但NC組和SS組以及ST組和S+T組分別比較均有顯著差異(P＜0．05)。(3)束縛應(yīng)激后，胸腺和脾臟的組織形態(tài)學(xué)發(fā)生改變：應(yīng)激組的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)顯著低于未應(yīng)激組(P＜0．01)

4、。(4)應(yīng)激組的胸腺和脾臟免疫細(xì)胞Caspase-3陽性率分別明顯高于未應(yīng)激組(P＜0．01)。(5)應(yīng)激組的海馬神經(jīng)元數(shù)目明顯低于未應(yīng)激組(P＜0．05)；而應(yīng)激組海馬各分區(qū)神經(jīng)元Caspase-3陽性率明顯高于未應(yīng)激組(P＜0．01)。(6)S+T組與ST組比較，S+T組種植腫瘤的平均重量明顯高于ST組(P＜0．05)；而且S+T組的腫瘤細(xì)胞的惡性程度也高于ST組。 結(jié)論：慢性束縛(心理)應(yīng)激使海馬神經(jīng)元數(shù)目減少，并激活海馬